目的淋巴增强结合因子-1（LEF1）是淋巴增强因子/T细胞因子（LEF/TCF）家族的一员，LEF1在细胞的增殖、分化和死亡方面起到重要的调节作用。既往研究显示在慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞中LEF1表达明显增强。最近的研究发现LEF1还可以通过抑制程序性坏死通路而促进CLL细胞存活。此外，依他尼酸（EA）可以通过靶向作用于LEF1而对CLL细胞产生毒性作用。本实验旨在研究CLL患者体内LEF1表达水平与其临床特征及预后的相关性，深入研究EA通过靶向作用LEF1而杀伤CLL细胞的机制，并探讨EA辅助化疗增强CLL疗效的可能性。方法分别使用荧光定量PCR及western blot检测CLL患者标本中LEF1mRNA及蛋白的表达水平。采用小干扰RNA转染技术沉默LEF1及其下游靶基因，观察CLL原代细胞的存活情况，以研究LEF1的基因功能。用EA体外干预CLL原代细胞，荧光定量PCR及western blot检测细胞中LEF1及下游基因的表达水平变化，染色质免疫共沉淀检测EA对LEF1功能的影响，确定EA对CLL毒性作用的靶点及机制。结果LEF1在单克隆B淋巴细胞增多症（MBL）及CLL细胞中表达水平明显高于正常B细胞(P＜0.0001)。LEF1过度表达与CLL患者IGHV基因无突变状态呈正相关（P=0.0002），高表达LEF1的患者其无治疗存活（TFS）和总生存（OS）均明显短于LEF1表达水平较低的患者（TFS：P=0.0356；OS：P=0.003）。此外对于伴有p53基因异常的CLL患者，LEF1高表达的患者其OS明显短于低表达LEF1的患者（P=0.0066）。在体外实验中，EA可以同时诱导CLL细胞发生凋亡和程序性坏死。EA可以抑制LEF1与DNA启动子的结合，促进圆柱瘤病基因（CYLD）的表达水平，从而对CLL细胞发挥毒性作用。当CYLD基因表达受到抑制后，EA对CLL细胞的毒性作用减弱。此外，当加用EA与氟达拉滨（或环磷酰胺）共同干预CLL细胞时， CLL细胞活性较单用氟达拉滨（或环磷酰胺）时明显下降。结论MBL细胞和CLL细胞中LEF1的表达水平明显高于正常B细胞，LEF1是CLL的不良预后因素。EA可以同时诱导CLL细胞发生凋亡和程序性坏死。EA对CLL细胞的毒性作用与其干扰LEF1功能，并增强CYLD的表达有关。EA可以增强氟达拉滨和环磷酰胺对CLL细胞的毒性作用。目的慢性淋巴细胞白血病（CLL）是一种以形态成熟但功能存在缺陷的小B淋巴细胞在骨髓和免疫器官内的大量积聚为主要特征的恶性血液病，虽然目前联合化疗以及免疫治疗的使用能使得多数患者的病情得到缓解，但CLL仍难以治愈。CLL的临床经过及预后具有高度异质性，近几十年的研究已经发现多种因素与其预后相关，其中免疫球蛋白重链可变区（IGHV）的突变状态是CLL最稳定的预后因素之一，IGHV基因无突变一般提示患者预后不良。圆柱瘤病基因（CYLD）是一种近期发现的抑癌基因，其编码蛋白通过调节靶蛋白的泛素化状态，从而参与了多条细胞信号通路的调节。CYLD在调节多种细胞增殖和死亡中起到了重要作用。本实验探讨CLL患者CYLD mRNA的表达特征及其与预后的相关性。方法我们采用荧光定量PCR技术检测了125例CLL患者中CYLD mRNA的表达，分析其表达水平与患者年龄、疾病分期、外周血淋巴细胞计数、染色体核型、细胞免疫表型、IGHV突变、p53基因异常及NOTCH1突变之间的相关性，进一步探讨其与疾病无治疗生存期（TFS）和总生存期（OS）的相关性。结果CYLD mRNA的表达水平在CLL细胞内明低于正常CD19+B细胞（P<0.0001）。CLL细胞的CYLD平均相对表达水平为0.038±0.004，正常CD19+B细胞中CYLD的平均相对表达水平则为0.155±0.019。在125例CLL患者中，男90例，女35例；中位年龄60岁（31-92岁）；Rai分期0-2期83例，3-4期42例；Binet分期A期59例，B期28例，C期38例。在82例伴有IGHV突变的患者中，其CYLD平均相对表达水平为0.045±0.005；在43例不伴有IGHV突变的患者中，CYLD平均相对表达水平为0.025±0.004。可见CYLD的高表达与IGHV基因突变呈正相关（P=0.0499）。在32例CD38阳性的患者中，CYLD的平均相对表达水平为0.027±0.005，在73例CD38阴性的患者中， CYLD的平均相对表达水平为0.041±0.005，可见CYLD的高表达与CD38阴性呈正相关（P=0.0499）。在125例CLL患者中，CYLD表达水平与年龄、疾病分期、外周血淋巴细胞计数、染色体核型、细胞免疫表型、p53基因异常及NOTCH1突变并无相关性（P>0.05）。进而就CYLD对CLL患者TFS及OS的相关性分析得出，CYLD低表达的患者，其中位生存期为150个月，而CYLD高表达的患者其中位生存期尚未达到。说明CYLD高表达提示患者有较长的生存期，但该结果未达到统计学意义（P=0.0534）。CYLD对CLL患者的TFS并无相关性。此外，对于伴有IGHV突变的CLL患者来说，CYLD高表达的CLL患者，其OS也明显优于低表达组，该结果未达到统计学意义（P=0.0547）。结论在CLL细胞中，CYLD mRNA的表达水平明显低于正常B细胞。CYLD的高表达水平与IGHV突变状态和CD38表达阴性呈正相关。CYLD高表达水平提示着较长的OS。