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本试验以丽格海棠(Begonia×Elatior)叶片、叶柄及茎段为外植体,通过培养直接诱导不定芽的形成,继而进行增殖培养,最后诱导生根、炼苗移栽,以便建立快速高效的丽格海棠组织培养技术体系。通过单因子试验筛选影响因素,正交设计试验确定最优技术参数组合,以MS为基本培养基,研究了外植体类型及外植体前处理措施,生长素、细胞分裂素类型及其配比对不定芽分化的影响,探索丽格海棠增殖培养适宜的激素类型及配比;在此基础上研究氮素形态及配比以及KH2PO4和蔗糖的浓度对丽格海棠增殖生长的影响;此外还对蔗糖与白砂糖的增殖效果进行对比;最后,对丽格海棠试管苗生根培养基进行筛选,应用L9(34)正交设计确定最佳IBA、KT与大量元素用量组合。通过对试验结果作极差分析并进一步进行方差分析及多重比较,确定了丽格海棠组织培养的一系列技术参数组合,有效地提高了繁殖效率,研究结果表明: ①丽格海棠离体培养适宜的外植体类型为中度成熟茎段(不带芽),其死亡率低、分化出芽快且分化率高,叶片和叶柄取材容易但是分化时间长且分化率低;②将茎段及叶柄先于4℃下冷藏20h,然后再消毒接种,能有效解决二者离体条件下分泌物外渗导致自身死亡的问题,提高了初代培养的成功率;③初代培养适宜的生长素与细胞分裂素分别为NAA和6-BA,且6-BA0.75mg·L-1+NAA0.1mg·L-1处理中外植体分化率最高,是诱导丽格海棠组织培养不定芽分化适宜的激素配比;④继代增殖培养适宜的生长素及细胞分裂素分别为NAA和KT,0.5mg·L-1KT与0.08mg·L-1NAA配合使用增殖效果最好。此外,丽格海棠增殖生长不宜转瓶过早,否则芽苗生长缓慢,芽苗继代多次后仍不适合分棵,而将继代培养时间延长到40d,芽苗增高效果显著;⑤丽格海棠组织培养增殖生长需要Ni4+与NO3-配合使用。在MS基础上,高浓度的NH4+对芽苗有毒害作用,相对而言,较高水平的NO3-能促进丽格海棠组织培养的增殖生长,且NH4+/NO3-为1/2时增殖效果最好;⑥1/2MS中的KH2PO4即可满足丽格海棠组织培养增殖生长的需要,KH2PO4水平过高反而抑制增殖;⑦丽格海棠组织培养增殖生长适宜的蔗糖浓度为30g·L-1,蔗糖浓度过高抑制增殖,且浓度越高抑制程度越大;⑧优级白砂糖作为碳源对丽格海棠增殖生长的效果与分析纯蔗糖相比没有明显差异,从而可以大大降低组培成本;⑨丽格海棠试管苗生根较容易,不加任何激素的MS培养基即可诱导其生根,但是所生的根比较细弱,单一生长素可以诱导丽格海棠生根,但是效果也不理想,而IBA与KT配合使用显著促进生根,且提高了生根质量,此外,丽格海棠试管苗生根适宜的培养基配方为:3/4MS+IBA0.3mg·L-1+KT0.15mg·L-1。