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幼畜体外胚胎生产和移植技术(juvenile in vitro embryo transfer, JIVET)是一项集幼畜超数排卵、卵母细胞体外成熟、体外受精、胚胎体外培养及胚胎移植为一体的技术。JIVET技术能够大大地缩短家畜繁殖的世代间隔,充分发掘优良母畜的繁殖潜能,提高畜群的遗传改良速度与生产效率,为家畜育种提供丰富的遗传资源。体外受精技术是JIVET技术的一个重要环节,通过提高体外受精培养效果,能显著提高后期胚胎的生长及发育质量,有效地提高JIVET技术的生产效率。本研究以新西兰幼龄兔为主要研究对象,经幼龄兔超数排卵和卵母细胞体外成熟,对体外培养成熟的卵母细胞进行体外受精。在受精培养体系中添加不同浓度EGCG(0、5、10、15、20、25μM),以研究抗氧化剂EGCG对精子获能及幼龄兔卵母细胞受精的影响,并且与受精液添加相同浓度EGCG的成年兔体外受精效果进行对比研究,旨在建立一种高效的培养体系,改善幼龄兔卵母细胞体外受精培养效果。并运用实时荧光定量技术对OCT-4、GDF-9、Bcl-2基因在幼龄兔及成年兔体外受精生产胚胎中的相对表达量进行研究,从分子水平研究这两类早期胚胎的基因表达差异,为提高幼龄兔胚胎后期发育质量提供理论基础。本次研究结果如下：1、在精子获能液中添加浓度为0、5、10、15、20、25μM EGCG,获能培养后,加入孕酮诱导获能精子发生顶体反应,而后采用考马斯亮蓝染色法进行观察分析,其结果表明获能液中添加不同浓度EGCG对精子获能效果具有显著的影响(P<0.05),其中获能液中添加10μM EGCG浓度的精子获能效果显著高于其他各组(P<0.05)。2、在受精液中添加浓度为0、5、10、15、20μM EGCG,对幼龄兔及成年兔受精率进行统计分析,其结果表明不同浓度的EGCG对幼龄兔及成年兔卵母细胞体外受精均具有显著性的影响(P<0.05),在幼龄兔受精液中添加浓度为5μM、10μM、15μM、20μM EGCG时,其受精率显著高于0μM(P<0.05),成年兔受精液中添加浓度为5μM、10μM、15μM EGCG时,其受精率显著高于0和20μM(P<0.05),而在幼龄兔及成年兔受精培养体系中添加相同浓度EGCG,其受精率没有显著差异(P>0.05)。3、采用实时荧光定量技术对幼龄兔及成年兔早期胚胎中OCT-4、GDF-9、Bcl-2基因表达进行相对定量分析,其结果表明,幼龄兔胚胎中OCT-4、GDF-9基因相对表达量显著低于成年兔基因表达量(P<0.05),而Bcl-2基因相对表达量虽然低于成年兔胚胎相对表达量,但两者差异不显著(P>0.05)。