四种百合黄酮类化合物分离纯化与抗氧化作用的研究

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植物黄酮类化合物具有抗氧化、抗疲劳和抗衰老等多种保健功效。本文对兰州百合(Lilium. davidii var. unicolor)、卷丹百合(Lilium. lancifolium)、细叶百合(Lilium. pumilum)与渥丹百合(Lilium. concolor)球茎中黄酮类化合物进行分离提纯,测定了粗分离产物总黄酮含量,研究了采用大孔吸附树脂对粗提取物的纯化工艺。以芦丁、儿茶素、槲皮素和黄岑素等四种标品为参比,利用高效液相色谱法对经过纯化处理后的百合总黄酮提取物成分与含量进行检测。并通过建立体外氧化体系考察四种纯化后的百合总黄酮之间抗氧化与清除自由基能力的差异,为合理并有效的开发与推广百合资源提供了科学依据。1、利用超声波提取法对四种百合总黄酮进行粗分离,并通过分光光度法测定了百合鳞茎干粉中黄酮类化合物的含量,兰州百合(L. davidii var. unicolor)、卷丹百合(L. lancifolium)、细叶百合(L. pumilum)与渥丹百合(L. concolor)的含量分别为1.65mg/g、2.19mg/g、3.61mg/g、4.06mg/g。2、研究了D-101大孔吸附树脂对四种百合总黄酮粗取物的纯化分离工艺,确定出纯化分离操作的最佳工艺:上样流速为1BV/h,洗脱流速为1BV/h,洗脱剂用量为3BV,洗脱剂浓度为90%乙醇溶液对兰州百合(L. davidii var. unicolor)总黄酮的洗脱效果最佳,而70%乙醇溶液对卷丹百合(L. lancifolium)、细叶百合(L. pumilum)与渥丹百合(L. concolor)的洗脱效果最好。3、以芦丁、儿茶素、槲皮素和黄岑素等标品为参照,采用高效液相色谱法对纯化后四种百合总黄酮提取物进行色谱分析,结果表明,四种百合总黄酮提取物中均未发现芦丁、儿茶素和槲皮素,只检测出黄岑素。兰州百合(L. davidii var. unicolor)、卷丹百合(L. lancifolium)、细叶百合(L. pumilum)与渥丹百合(L. concolor)总黄酮提取物中含黄岑素的含量分别为54.47mg/g、30.82mg/g、22.23mg/g、17.95mg/g。4、通过体外抗氧化试验考察了纯化后的四种百合总黄酮提取物与芦丁清除自由基的能力。兰州百合、卷丹百合、细叶百合与渥丹百合总黄酮提取物及芦丁在相同药液浓度下对O2-离子的最大清除率分别为87.39%、89.64%、86.74%、89.97%与52.55%,对O2-离子的清除效果为:渥丹百合总黄酮>卷丹百合总黄酮>细叶百合总黄酮>兰州百合总黄酮>芦丁;相同浓度下对·OH自由基的最大清除率,分别为25.35%、62.83%、75.59%、91.78%与35.68%,对·OH自由基的清除效果为:渥丹百合总黄酮>细叶百合总黄酮>卷丹百合总黄酮>芦丁>兰州百合总黄酮;相同浓度下,对DPPH的最大清除率分别为40.06%、47.45%、52.43%、59.03%与40.63%;对DPPH自由基的清除效果为:渥丹百合总黄酮>细叶百合总黄酮>卷丹百合总黄酮>兰州百合总黄酮>芦丁。5、通过对总黄酮含量及清除自由基能力的综合分析得出,野生种渥丹百合、细叶百合、卷丹百合较食用栽培种兰州百合抗氧化领域更具推广和食用药用价值。
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