背景Behcet病（BD）是一种长期的、慢性的与免疫相关的炎症性疾病。其主要的病理特征是多系统的血管炎。主要的临床表现为反复发作的口腔溃疡及会阴部溃疡，结节性红斑等皮肤损害，复发性的葡萄膜炎。若病变累及肠道、肺、肾脏及血管等多处，便会出现相应的症状。之前有报道T细胞功能异常在BD的发病机制中起到重要作用，并且T细胞数量的增加与BD的活动期相关。研究证实Th1和Th17细胞均在BD的发展过程中起到重要的作用。Vogt-小柳原田综合征（VKH syndrome）是累及全身多系统的一种急性弥漫性色素膜炎。其主要的特征有：双侧的肉芽肿性葡萄膜炎及伴发的眼外症状，如毛发变白、听力下降、白癜风，秃头症及中枢神经系统损害。在感染或者其他情况引起的对黑色素细胞的自身免疫反应被认为与VKH综合征的发病机理有关。先前的研究证明CD4T细胞及一些炎症性细胞因子在VKH的发病过程中起到至关重要的作用。尽管这两种疾病确切的发病机制还未完全阐明，近来的研究证实遗传的易感性与这两种疾病密切相关。人类白细胞抗原(humanleukocyte antigen) HLA-B51, IL-23R, DHCR7, TLR-2这些基因与BD有显著的相关性。另外HLA-DR4, IL-17, STAT4，HLA-DR4, IL-17, STAT4被证实是VKH综合征的易感基因。白介素是免疫系统中有关信号转导的细胞因子的一种，其在调节T细胞功能起着非常重要的作用。IL-12B基因编码IL-12p40亚基，IL-12p40是IL-12和IL-23的共用亚基。IL-12p40这个活性亚基主要由巨噬细胞和树突状细胞（DC）在有病原体或是炎症因子的情况下产生。IL-12p40缺陷会引起DC迁移减少并导致DC激活naive T细胞的能力下降。IL-12p40还被证明与两类涉及多种免疫反应的细胞Th1和Th17的功能有关，有研究指出分泌不同剂量的IL-12p40对T细胞功能有着很显著的影响。IL-12B基因突变被发现与强直性脊柱炎、牛皮癣等自身性疾病显著相关。IL-12Rβ1是IL-12和IL-23共用受体，其对记忆性CD4T细胞的功能和发展过程均有非常重要的作用，并且进一步的研究已经证实IL-12Rβ1依赖的通路对Th17细胞亚群的分化和增殖尤其必要。 IL-12Rβ1缺陷的老鼠出现对Experimental AutoimmuneEncephalomyelitisn（EAE）的抵抗。IL-12Rβ1基因的突变被证明与很多自身免疫性疾病相关。IL-12Rβ2是IL-12的另外一个受体，IL-12Rβ2主要对Th1的功能有重要的作用并且与IL-17的表达有密切的关系。IL-12Rβ2缺陷会导致激活的T细胞被招募的数量减少，而且会引起炎症性细胞因子表达的异常情况出现。基于以上背景，这三个相互关联的基因均与Th1和Th17密切相关，我们想研究它们的基因多态性是否与我们的疾病密切相关。我们选择BD和VKH这两种最有代表性的葡萄膜炎疾病在足够的大样本中进行基因易感性研究。在本研究中，我们选取了三个基因(IL-12B, IL-12Rβ1and IL-12Rβ2)的8个先前报道的与自身免疫性疾病有着显著的相关性SNP位点进行基因多态性与疾病的相关性研究。第一部分IL-12B, IL-12Rβ1及IL-12Rβ2在Behcet病中遗传易感性研究目的：探讨IL-12B, IL-12Rβ1及IL-12Rβ2基因多态与Behcet病的相关性。方法：本研究中总共包括了806例BD患者，1600例正常对照。第一阶段有400例BD，600例正常人作为研究对象，第二阶段包括了另外的406个BD患者及1000例正常健康对照。SNP分型采取PCR-限制性片段基因分型（PCR-restriction fragment length polymorphism assay）的方法。应用直接测序来检测分型结果是否准确。χ2检验用来比较基因型及其等位基因频率在病人和正常人之间是否有差异。结果：1.第一阶段选取了三个基因IL-12B, IL-12Rβ1及IL-12Rβ2的8个SNP位点进行研究，8个位点在400个BD病人及600个正常对照的样本中均成功分型，正常对照样本的分型结果数据均与哈迪-温伯格平衡一致。2.第一阶段中，发现rs3212227∕IL-12B基因型CC和等位基因C的频率在BD患者中明显高于正常人(pc=0.009, OR1.8,95%CI1.3to2.4; pc=0.024, OR1.3,95%CI1.1to1.6,分别的)。3.第一阶段中，其他七个SNP的基因型及基因频率在BD和正常对照组之间没有发现有明显的统计学差异。4.为了更好地确认第一阶段的结果，第二阶段中，又研究了另外一组的病人和正常人，结果发现此组中rs3212227∕IL-12B的基因型CC和等位基因C的频率在BD患者中也是明显高于正常人(pc=3.5×104, OR=1.8,95%CI1.4to2.4; pc=0.002, OR=1.4,95%CI1.2to1.6,分别的)。5.综合第一阶段和第二阶段的数据进行分析，发现rs3212227∕IL-12B的基因型CC和等位基因C与BD有明显的相关性(pccomb=6.3×107, OR=1.8,95%CI1.5to2.2; pccomb=2.0×105, OR=1.3,95%CI1.2to1.5,分别的)。6.由于BD常累及多个系统及器官，我们将BD的临床表现与所研究的SNP位点进行关联性分析，结果发现没有显著的统计学差异。结论：我们的结果表明在中国汉族人群中，rs3212227∕IL-12B的基因型CC和等位基因C的频率在BD中明显增高，IL-12B与BD有显著相关性。第二部分IL-12B, IL-12Rβ1及IL-12Rβ2在Vogt-小柳原田综合征中遗传易感性研究目的：研究IL-12B, IL-12Rβ1及IL-12Rβ2基因多态与Vogt-小柳原田综合征的相关性。方法：研究对象总共包括了820例VKH患者，1600例正常对照。第一阶段包含400例VKH，600例正常对照，第二阶段包括了另外一组420个VKH患者和1000例正常健康对照。采取PCR-限制性片段基因分型（PCR-restriction fragment length polymorphism assay）的方法进行SNP分型。直接测序的应用来确认分型结果的准确性。采用χ2检验来统计基因型及其等位基因频率在VKH患者和正常对照之间是否有差异。结果：1.在第一阶段中，IL-12B, IL-12Rβ1及IL-12Rβ2的8个SNP位点在VKH病人和正常对照间进行研究，8个位点在400个VKH患者及600个正常人的样本中成功分型，并且正常对照样本的分型数据均与哈迪-温伯格平衡一致。2.第一阶段的研究发现rs3212227∕IL-12B等位基因C的频率在VKH患者中高于正常人(pc=0.012, OR1.3,95%CI1.1to1.6)。3.第一阶段中，其他七个SNP的基因型及基因频率在VKH病人和正常对照组之间无明显的相关性。4.与第一阶段的结果一致，第二阶段中，在另外一组的病人和正常人中，rs3212227∕IL-12B的等位基因C的频率在VKH病人中较正常人相比也是明显增高(pc=0.046, OR1.3,95%CI1.1to1.6)。5.第一阶段和第二阶段的所有数据进行综合分析比较，发现rs3212227∕IL-12B的等位基因C是VKH的风险因素(pc=2.5105,OR1.3,95%CI1.2to1.5)。6.将VKH的临床特征与所研究的SNP位点进行相关性分析，结果发现没有明显的统计学差异。结论：我们的结果表明：在中国汉族人群中，rs3212227∕IL-12B的等位基因C的频率在VKH病人中明显增高，IL-12B与VKH有显著的相关性。