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软骨藻酸(DA),是一种强烈的神经毒性贝类毒素,毒性强。研究建立复杂环境或水产样品中痕量软骨藻酸的高效分析和超高灵敏检测技术,对海洋食品安全和环境安全分析具有重要意义。本文从高效液相色谱(HPLC)和荧光检测(FLD)着手,构建了 DA的HPLC-FLD分析技术、二维HPLC-FLD联用技术,开展了痕量软骨藻酸的快速、高效、高灵敏的二维色谱分离行为研究及分析应用。主要内容具体如下:第一部分,文献综述。概述了软骨藻酸主要分析方法的研究进展,评述了二维液相色谱分离及其联用技术,总结提出了本论文的选题依据和设计方案。第二部分,构建了痕量软骨藻酸(DA)的HPLC-FLD分析技术。考察了不同基质中DA的荧光标记产物的色谱分离行为及基质效应,优化了 DA荧光标记反应条件、DA荧光标记产物分离行为和样品基质干扰影响,实现了不同贝类样品和海水中痕量DA的高效分析,检测限为0.5 ng/mL,贝类和海水样品中DA加标回收率分别为76.7%～97.7%、89.3～95.6%。第三部分,构建了软骨藻酸的在线二维HPLC-FLD联用分析新技术。系统研究了软骨藻酸的二维色谱分离行为,考察了第一维色谱进样体积、第二维色谱采样体积、两维色谱中各自流动相组成等技术参数对DA富集和分离检测的影响。第一维采用极性硅胶包埋C18键合相对DA荧光衍生物进行预富集,第二维采用ODS反相色谱柱对目标物进行分离分析,结合中心切割技术,优化建立了贝肉和海水样品中DA的二维液相色谱在线富集-连续分离的分析模式,实现了贝肉、海水中DA与背景物质的基线分离和超高灵敏度检测,贝类中DA检测限达到1ng/g,海水中DA检测限达25pg/mL,两者加标回收率分别为71.0%～90.6%、88.1%～97.1%,分析灵敏、准确。第四部分,研究建立了不同饲养时间内贝类富集海水中痕量DA的动态变化曲线,探索研究了贝类对海水中微量DA的富集行为。基于实验建立的在线二维HPLC-FLD联用分析方法,系统考察了贝类(花蛤)在不同海水介质、不同饲养周期中贝类(花蛤)体内软骨藻酸的含量变化,建立了贝类(花蛤)富集海水中DA随时间变化的动态曲线,分析海水中DA浓度对DA在贝类(花蛤)体内富集程度的影响,贝类(花蛤)对海水中DA的富集效果可以达到近10倍(18天内),初步构建了基于海水中痕量DA毒素分析推测贝类体内DA毒素浓度的方法,为贝类体内DA残留评估及早期预警展开了新的探索。