【摘 要】
：
Sec14超家族广泛存在于酵母、植物及哺乳动物中,是一类脂质转运蛋白（lipid transfer protein,LTP）。该超家族成员共有的Sec14结构域是脂质转运结构域（lipid transfer domain,LTD）,包含一个脂质结合口袋,能够结合、转运脂质。首先,酵母中表达了 6个Sec14同源蛋白,包括酵母Sec14蛋白（Sec14p）及其同源蛋白（Sec14p homologu
论文部分内容阅读
Sec14超家族广泛存在于酵母、植物及哺乳动物中,是一类脂质转运蛋白（lipid transfer protein,LTP）。该超家族成员共有的Sec14结构域是脂质转运结构域（lipid transfer domain,LTD）,包含一个脂质结合口袋,能够结合、转运脂质。首先,酵母中表达了 6个Sec14同源蛋白,包括酵母Sec14蛋白（Sec14p）及其同源蛋白（Sec14p homologues,Sfh）,研究发现这些蛋白通过其Sec14结构域能够结合、转运多种磷脂。其中,酵母Sec14p是Sec14超家族的原型,被鉴定为一种磷脂酰肌醇转运蛋白,它对于高尔基复合体的蛋白转运功能是必需的。随后,在哺乳动物源体系中发现了多个Sec14同源蛋白,其通过Sec14结构域能够结合磷脂或小分子。此外,多个结构生物学研究阐述了酵母及哺乳动物中Sec14同源蛋白的Sec14结构域识别配体的分子机制。植物中也存在大量Sec14同源蛋白,但对其结合脂质的能力及机制均不清楚。拟南芥中共表达32个不同的Sec14同源蛋白,分为三个亚家族,即AtPITP、AtSFH及AtPATL。本论文的研究对象为与酵母Sec14p的序列同一性最高的AtSFH亚家族,该亚家族含14个AtSFH蛋白。其中,AtSFH11和AtSFH14只含有Sec14结构域,而其他AtSFH蛋白均含有一个N端Sec14结构域和一个C端Nodulin结构域。本论文的研究重点为AtSFH蛋白的Sec14结构域。首先,我们从拟南芥cDNA文库中扩增了 AtSFH的全长基因,并在体外构建了其全长及Sec14结构域的克隆;其次,在大肠杆菌体系中表达重组蛋白,通过一系列纯化方法得到高纯度的蛋白样品;随后,利用蛋白-脂质覆盖实验及NBD标记脂质的结合实验,对得到的AtSFH的Sec14结构域蛋白进行脂质结合能力研究。实验结果证明了 AtSFH的Sec14结构域能够结合PC、PE及多种PIP。最后,对优质的AtSFH的Sec14结构域蛋白进行结晶实验,并成功获得AtSFH1/4的Sec14结构域的晶体。通过一系列优化程序,初步解析了 AtSFH1-Sec14结构域的结构。
其他文献
新时代党和国家事业的发展需要提升基层干部解决实际问题的能力。基于对国家领导人讲话与学者有关领导干部能力建设的分析，结合实地调研，研究设计了基层领导干部七种能力评价内容的调查问卷。依据A省B市352份调查问卷数据，综合探索性因子分析及结构方程模型构造，得到基于“七种能力”的基层领导干部能力评价模型。验证发现，模型具备良好的信度和效度，为新时代基层领导干部解决实际问题能力的提升研究奠定了基础，提供了一
血小板减少是造血干细胞移植（Hematopoietic stem cell transplantation,HSCT）后常见并发症。大部分患者可以平稳地渡过血小板减少期,血小板计数（Platelets count,PLT）逐渐恢复至正常水平,实现血小板重建。但仍然有5%～37%患者会出现血小板植入延迟,或血小板成功植入后再次出现血小板减少。临床将这两种血小板重建方式定义为血小板重建延迟（Delay
[目的]探讨生物反馈对排便障碍型便秘患者胃肠功能、胃肠激素及直肠Cajal间质细胞（Interstitial cells of Cajal,ICC）的影响。[方法]选取2019年11月～2020年11月在本院接受治疗的排便障碍型便秘患者120例,采用随机数字表法分为对照组60例和研究组60例,对照组患者行常规治疗,研究组患者在此基础上接受生物反馈治疗。比较治疗前后两组便秘患者症状自评量表（PAC-
CAR-T疗法是一种靶向免疫疗法,通过对T细胞进行体外编辑,使其能够特异性的识别肿瘤相关抗原,释放穿孔素、颗粒酶等物质杀伤肿瘤细胞,从而达到控制甚至清除肿瘤的目的。在血液系统恶性肿瘤的治疗中,CAR-T疗法取得了惊人的疗效,但是在实体瘤治疗中却一直未能突破,肿瘤抗原异质性、免疫抑制的肿瘤微环境以及免疫细胞归巢难、浸润难都是亟待解决的问题。在本研究中,选择了 B7-H3作为靶点构建CAR-T细胞,B
circRNAs是一种共价闭合单链的环状分子,不易被核酸酶降解,具有miRNA海绵体、与蛋白互作、翻译蛋白等多种功能。目前,关于细胞内源性的circRNAs有很多,但病毒编码circRNAs研究相对较少。在本实验室前期的研究中,通过高通量测序发现家蚕核型多角体病毒（Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus,BmNPV）可形成 circRNA,其中 circ10 起源于 Bm
背景:炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）是一种主要累及回肠和结直肠的炎症性肠道疾病,主要包括克罗恩病（crohn disease,CD）和溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）。IBD的病因尚未明确,目前认为,可能与宿主遗传、免疫功能障碍、肠上皮屏障功能障碍以及环境等因素有关。虽然临床上已经应用了一些抗炎药物来对IBD患者进行治疗,但大多
开发区是中国经济社会高质量发展的主阵地,也是沿江沿海地区经济发展的强劲引擎。近年来,中国开发区的快速发展,带动了周边乡镇的发展,与此同时,开发区与周边乡镇的资源竞争也越来越明显。因此,开发区与周边乡镇合二为一的区镇合一管理方式,成为促进开发区与周边乡镇共生发展的有效途径。本文主要选取江苏Q市区镇合一管理实践展开具体的分析研究。本文以江苏Q市区镇合一管理运行至今的实践情况为样本,通过文献研究、案例分
目的:放射治疗是脑肿瘤和头颈部肿瘤的重要治疗手段。但在脑部放射治疗中,不可避免地使正常脑组织受到照射,导致放射性脑损伤。RPRM是一种可被DNA损伤诱导表达的抑癌基因,在人类大脑中尤其在海马组织、皮层这些重要功能区域有丰富表达。RPRM参与细胞和组织的多种生理病理过程。本课题组之前的研究证实RPRM对细胞的DNA损伤应答反应和放射敏感性具有重要决定作用。具体来说,高表达RPRM抑制细胞的DNA损伤
生物钟广泛存在于地球生物,虽然生物钟核心成员的分子进化和作用模式在不同物种中具有保守性,但已发现存在很多差异。对于生物钟昼夜节律分子机制的理解,主要来自于小鼠和果蝇等少数经典模式生物,有必要在更多物种中开展相关研究。家蚕是畜牧饲养的经济昆虫,也是占农林害虫70%的鳞翅目唯一的模式物种。家蚕生物钟-羽化调控机制是影响养蚕生产和关系农林害虫防治的重要科学问题。本文利用2个核心钟基因敲除突变体家蚕系,首
背景与目的:前体信使RNA（pre-mRNA）剪接是去除内含子,将外显子连接的过程,是真核基因表达转录后水平调控的重要环节。人类基因组中,大多数内含子的平均长度是外显子的10倍以上。剪接依赖于剪接体从成千上万的内含子核苷酸中正确识别外显子。外显子主要由4种核心剪接信号定义,包括5’剪接位点（5’splice site,5’ss）、3’剪接位点（3’splice site,3’ss）、分支点序列和多