化学发光分析是基于某些化学反应产生的光发射现象而建立的一种分析方法。化学发光分析具有灵敏度高、线性范围宽、仪器设备简单、分析速度快等优点,已被广泛应用于生命科学、药物分析、临床检验、环境检测等领域。本论文对近五年来化学发光分析的新进展和新技术进行了简单介绍,其中包括化学发光共反应物、新材料增强化学发光、化学发光共振能量转移、化学发光成像分析以及化学发光与智能手机。在本研究工作中,详细研究了荧光素及其衍生物、抗坏血酸等作为鲁米诺反应体系的共反应物的化学发光行为,建立了测定钴离子和抗坏血酸的流动注射化学发光分析方法,研究了这些方法在实际样品分析中的可行性。第一部分,鲁米诺和荧光素及其衍生物在碱性介质中可以直接发生反应并产生化学发光信号。该反应体系在碳酸盐缓冲溶液中有最大的化学发光强度,向鲁米诺-二溴荧光素体系中加入0.2 μmol/L钴离子溶液后,该反应体系的化学发光信号增强了约23倍。鲁米诺一二溴荧光素体系表现出对钻离子较高的高灵敏度和较高的选择性。在最佳实验条件下,钻离子浓度在5~1000.0nmol/L范围内与发光强度呈良好的线性关系,检测限为1.8nmol/L钻离子。对浓度为0.2μmol/L钻离子溶液进行11次平行测定,相对标准偏差为3.2%。该方法简单,成本低廉,已应用于蓝色硅胶样品中钴离子含量的检测,结果令人满意。该反应体系的化学发光光谱在425 nm和535 nm处有两个最大发射峰,其中,425 nm处为鲁米诺的典型发射峰,535 nn处为二溴荧光素的最大发射峰。在碱性溶液中,荧光素及其衍生物发生自氧化反应生成羟基自由基和单线态氧。在钴离子的催化下,鲁米诺被活性氧自由基氧化为激发态的3-氨基邻苯二甲酸离子并发射出波长为425 nm的光。激发态的3-氨基邻苯二甲酸离子和单线态氧将能量转移到二溴荧光素分子,形成激发态的二溴荧光素分子并发射出波长为535 nm的光。第二部分,在碱性介质中,抗坏血酸与鲁米诺反应产生化学发光信号,在钴离子存在时,该反应体系的化学发光强度被显著增强。根据此反应现象,建立了测定抗坏血酸的流动注射化学发光分析方法。该方法对抗坏血酸有良好的响应,线性范围为1~1000.0ng/mL,检测限为0.97ng/mL抗坏血酸。对浓度为0.5μg/mL抗坏血酸溶液进行11次平行测定,相对标准偏差为1.3%。同时,考察多种金属离子、氨基酸、蛋白质和生物小分子对测定的干扰情况,均未观察到对化学发光强度的明显干扰。该方法具有简单、灵敏、快速等特点,已应用于检测饮料样品中的抗坏血酸含量。此外,提出了可能的反应机理。在碱性介质中,抗坏血酸被溶解氧氧化为脱氢抗坏血酸,鲁米诺与脱氢抗坏血酸反应,形成激发态的3-氨基邻苯二甲酸离子并发射出波长为425 nm的光。本论文证明了荧光素及其衍生物、抗坏血酸可以作为鲁米诺反应体系的共反应物。据此建立了鲁米诺-二溴荧光素-钴离子化学发光体系和鲁米诺-钴离子-抗坏血酸化学发光体系,实现了对钴离子和抗坏血酸高选择性和高灵敏度的检测。同时,提出了可能的反应机理。