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日龄雏鸡的一次性被动回避学习模型(OPTAT)被广泛用于学习记忆机理和学习记忆药物初步筛选的研究,本文通过以下三方面的工作试图揭示:小电导的依赖于钙离子的钾离子通道(SK通道)在日龄雏鸡学习记忆中的作用;从雏鸡的一次性被动回避学习的层面来揭示亚磁场(磁场剥夺)对雏鸡发育过程中去甲肾上腺素(NE)系统的影响。三方面的工作分别为:(1)建立Apamin对日龄雏鸡学习记忆易化的研究方法,并开展相应的实验研究,(2)利用分子生物学实验技术制备SK2亚基的mRNA的探针,(3)磁场剥夺对脑内NE含量影响的研究。
1、用弱刺激OPTAT的行为学方法和核团内注射,研究中间腹内侧上纹体(IMHV)注射Apamin对日龄雏鸡长时记忆形成的影响。结果表明,两侧IMHV注射Apamin的最佳时间段为训练前5min至训练后2min和适宜浓度为0.07μg/ml;该条件下的Apamin可易化日龄雏鸡弱刺激OPTAT长时记忆的形成,但是不影响记忆的保持。左侧IMHV(L-IMHV)或右侧IMHV(R-IMHV)分别单侧注射0.07μg/ml的Apamin,对日龄雏鸡弱刺激OPTAT的长时记忆均无影响。而当L-或R-IMHV的Apamin单侧注射浓度为0.01μg/ml时,都可以促进日龄雏鸡弱刺激OPTAT长时记忆的形成,但最佳注射时间分别为训练前5min和训练后2min,呈明显的脑半球侧化现象。可见,所建立的Apamin对日龄雏鸡学习记忆易化的研究方法是可行的,不仅发现Apamin可促进日龄雏鸡与视觉相关的弱刺激OPTAT长时记忆的形成,并为研究Apamin对亚磁雏鸡学习记忆的影响提供了基础。
2、用分子生物学实验技术制备SK2亚基的mRNA探针。结果表明,雏鸡的IMHV确实存在SK2亚基的mRNA,并制备了SK2亚基的mRNA探针,为继后的原位杂交实验提供了基础和必要条件。
3、用高压液相色谱和电化学检测技术,及一次性被动回避学习模型(OPTAT)的行为学方法,比较分析亚磁场和自然地磁场中孵化的日龄雏鸡,即亚磁雏鸡和地磁雏鸡脑内相关记忆核团(IMHV)中NE的含量。结果显示,训练后10min(STM)两侧IMHV(L-和R-IMHV)的NE含量分别比未训练组的NE含量降低26.1%和25.5%,训练后60min(ITM)L-和R-IMHV的NE分别降低9%和28.6%,即表明地磁雏鸡IMHV的NE参与了OPTAT模型中的短时记忆(STM)和中时记忆(ITM)的形成。亚磁雏鸡IMHV的NE在训练后60min呈显著增加,L-和R-IMHV的NE分别增加57.3%和35.1%。看来,近似地磁场消除的亚磁空间有可能对雏鸡发育中IMHV的NE合成系统产生一定的负面影响。
以上结果首次表明与日龄雏鸡学习记忆相关的IMHV核团中的SK通道可能在雏鸡的记忆中具有重要的作用,以及由于亚磁场导致的IMHV核团内NE含量的变化可能是影响日龄雏鸡学习记忆的原因之一。