【摘 要】
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本研究以小鼠宫角注射为模型在体条件下研究了泛素-蛋白水解酶复合体通路(UPP)对小鼠胚胎植入及其血管发生的影响,随后以原代培养的正常人细胞滋养层细胞(NCT)为模型(以绒癌
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本研究以小鼠宫角注射为模型在体条件下研究了泛素-蛋白水解酶复合体通路(UPP)对小鼠胚胎植入及其血管发生的影响,随后以原代培养的正常人细胞滋养层细胞(NCT)为模型(以绒癌细胞系JEG-3为对照)在离体情况下研究了UPP对VEGF调节的机理.同时还研究了TGF-β1、IL-1β和IGF-1三种细胞因子或生长因子对NCT细胞和JEG-3细胞中VEGF表达调控的可能机理.我们的研究表明UPP通路在小鼠胚胎植入过程中起关键作用,调节血管发生是其影响胚胎植入的重要因素之一.而UPP通路对血管发生相关因子VEGF及其受体和主要转录因子HIF-1的表达调节则是导致该效应的直接原因.在体外NCT细胞的研究中发现,UPP的抑制造成了ERK1/2活性的丧失,而同时也诱导了HIF-1α蛋白的积累,但是这种抑制并不能影响VEGF的分泌,因此在此细胞中,ERK1/2不是HIF-1α的主要磷酸化途径,或其功能被其它磷酸化通路所替代.JEG-3细胞的UPP被抑制后,也造成了ERK1/2活性的丧失和HIF-1α蛋白的积累,但是HIF-1α不能被磷酸化,从而导致了VEGF表达的降低.TGF-β1、IL-1β和IGF-1是三种在胚胎植入过程中重要的血管生成诱导因子.在本研究结果中也表明这三种因子均能诱导细胞滋养层细胞中VEGF的分泌.其中TGF-β1和IL-1β强烈诱导NCT细胞中VEGF的分泌,其同时诱导的ERK1/2的活性可能在不同层次上参与了NCT细胞中TGF-β1和IL-1β诱导HIF-1α介导的VEGF的分泌,而JEG-3细胞中TGF-β1和IL-1β诱导的ERK1/2的活性只影响到HIF-1蛋白的活性.IGF-1能够诱导NCT细胞和JEG-3细胞中HIF-1α蛋白的积累,而且也显著增加了HIF-1靶基因VEGF的分泌,在NCT细胞中ERK1/2只参与了IGF-1诱导的HIF-1α蛋白的活性调节;而JEG-3细胞中IGF-1诱导的ERK1/2可能在多个层次上参与了TGF-β1诱导HIF-1α介导的VEGF的分泌.
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