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目的旨在探索红细胞寿命与其膜表面蛋白黏附分子CD47、CD44、CD147的相关性,建立一种红细胞寿命的检测方法。比较不同残余水含量组的冻干红细胞膜表面黏附分子CD47、CD44、CD147在保存期间的表达量变化,探索残余水对冻干红细胞寿命的影响。方法收集健康无偿献血者的红细胞标本(n=10),应用Percoll密度梯度离心法将红细胞分为5层,得到不同年龄段的红细胞,第1层为最年轻红细胞,下层红细胞年龄依次增加,第5层为最年老红细胞,通过流式检测红细胞膜表面黏附分子CD47、CD44、CD147的表达量,应用统计软件SPSS对分层的红细胞蛋白表达量进行方差分析。设置5种不同的冻干程序以制备不同残余水含量组冻干红细胞,应用卡尔费休滴定法(KFT)对其残余水含量进行测定,分别得到残余水含量为3.14%、4.63%、6.88%、7.02%、10.25%的五组冻干红细胞。于室温保存1天、7天、14天、30天、60天后将复水洗涤检测其红细胞膜表面黏附分子CD47、CD44、CD147的表达水平,以此分析不同残余水含量组冻干红细胞的寿命随保存时间延长的变化。结果应用Percoll密度梯度离心法分层后的红细胞,下层(年老)红细胞膜表面CD47、CD44、CD147蛋白分子的表达水平均比上层(年轻)红细胞低,经方差分析,各层红细胞膜表面蛋白分子表达量间具统计学差异。依据不同年龄层红细胞膜表面黏附分子表达量,CD47、CD44、CD147分子与寿命的相关性如下:CD47分子(Y1)与寿命(X1)的相关性可由对数模型解释,Y1=23.266-3.773ln(X1),R2=0.991,经方差分析显示,F=348.893,P<0.001,该模型具有统计学意义;CD44分子(Y2)与寿命(X2)的相关性可由对数模型解释,Y2=36.566-4.814ln(X2),R2=0.995,经方差分析显示,F=566.945,P<0.001,该模型具有统计学意义;CD147分子(Y3)与寿命(X3)的相关性可由线性模型解释,Y3=34.293-0.155(X3),R2=0.985,经方差分析显示,F=192.465,P=0.001,该模型具有统计学意义。本研究设置的五组冻干红细胞残余水含量分别为3.14%、4.63%、6.88%、7.02%、10.25%,冻干红细胞膜表面CD47、CD44、CD147分子表达水平均呈下调趋势,且在两周后下调趋势较明显;残余水含量为3.14%的冻干红细胞膜表面CD47、CD44、CD147表达量均高于其他残余水含量组红细胞,表明在3.14%-10.25%这一区间内冻干红细胞所含残余水含量越少,红细胞保存效果越好。结论红细胞膜表面黏附分子CD47、CD44、CD147分子与红细胞寿命相关,可作为红细胞寿命检测的标志物。随着红细胞年龄的增长,红细胞膜表面CD47、CD44、CD147蛋白分子的表达水平均呈显著下降趋势。冻干红细胞残余水的含量影响红细胞的寿命,本研究中残余水含量最低组的红细胞冻干保存效果最好,其残余水含量为3.14%。