近年来,毕赤酵母作为一个极好的外源基因表达系统被广泛应用于植酸酶的生产。本课题通过对植酸酶发酵过程主要影响因素的研究,优化了植酸酶摇瓶和发酵罐培养的工艺条件。此工程菌摇瓶培养阶段的最佳条件为:种龄20h,接种量5%,生长和诱导阶段培养基的最适pH值分别为5.5和6.0,使用山梨醇-甲醇混合碳源诱导,添加量恒定为2.4mL/天,每隔12h小时补加,最适诱导时间为60h。发酵罐阶段最佳工艺条件为:生长和诱导阶段培养基的最适pH值分别为6.0和6.5,发酵周期进一步缩短为54h,最终酶活达31985U/mL。目前植酸酶工业化生产的培养基成本较高,发酵周期又很长,在很大程度上提高了企业的生产成本。本研究采用廉价易得的麦芽汁-麦麸生长培养基和麦芽汁-麦麸高温浸提培养基培养毕赤酵母工程菌产植酸酶,同时优化了培养基的组成。向100g麦芽粉中添加15g麦麸作为培养基原料,在菌体生长阶段添加4%的玉米浆作为氮源补充,优化后酶活提高了近1倍。本课题还对目前植酸酶酶活测定使用最多的钒—钼酸铵法和钼蓝法两种方法的准确性和稳定性进行了研究,结果表明中华人民共和国国家标准《饲用植酸酶活性的测定——分光光度法》(GB/T 18634—2002)推荐使用的钒—钼酸铵法稳定性好且操作简便,适于植酸酶酶活的快速检验。本研究对毕赤酵母工程菌的培养基和发酵工艺进行了探索和优化,提高了植酸酶产率,缩短了生产周期。为工业化生产中降低植酸酶生产成本、提高酶表达量及发酵生产提供了科学依据。