竹叶花椒中黄酮类物质提取及抗氧化性研究

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竹叶花椒应用前景广泛,其根、叶、枝、果皮和籽都具有应用价值,可直接食用或以调料入味,或用于生物医药,目前竹叶花椒大多用于调味品行业,随着竹叶花椒产量的不断增加,迫切需要开发竹叶花椒的其他应用领域。合成抗氧化剂毒副作用大,而天然抗氧化剂具有绿色、安全的特点,因此将植物作为抗氧化剂的理想材料来源已成为抗氧化剂的发展趋势。竹叶花椒中黄酮含量占比大、抗氧化能力强,对其黄酮的研究,可为竹叶花椒在天然抗氧化剂、复合抗氧化剂、抗氧化功能性食品应用提供依据。本论文对竹叶花椒中黄酮类物质的提取、富集纯化等工艺进行了试验探究,确定了实验参数,并考察了提取黄酮的抗氧化性,为开发竹叶花椒生物医药应用提供了实验参考。采用微波辅助法并优化得到了从竹叶花椒中提取总黄酮的工艺参数:微波萃取溶剂为60%乙醇,竹叶花椒与乙醇溶液用量比为1:30 g·m L-1,微波萃取功率400 W,微波萃取温度80℃,微波萃取时间25 min,在最优条件下得到竹叶花椒总黄酮得率为9.20%。获得了两种树脂联用富集纯化竹叶花椒黄酮的影响因素和优化条件。利用聚酰胺-大孔吸附树脂联用富集纯化竹叶花椒黄酮提取液,通过单因素试验和响应面试验优化的工艺参数为:聚酰胺-大孔吸附树脂用量比为3:5、竹叶花椒黄酮粗提液的浓度为6mg·m L-1、竹叶花椒黄酮粗提液的流速为1.5 m L·min-1、60%乙醇为树脂洗脱溶剂、乙醇溶液流速为2 m L·min-1、乙醇溶液收集量为4 BV,该条件下得到总黄酮平均百分含量为87.35%。确定了竹叶花椒黄酮抗氧化性能力特性。以维生素C和芦丁为阳性对照,考察了竹叶花椒黄酮提取物的体外抗氧化活性。在DPPH·清除试验中,纯化黄酮浓度达到0.09mg·m L-1时,自由基清除率与维生素C和芦丁一致。在ABTS+·清除试验中,纯化黄酮浓度达到0.18 mg·m L-1时,反应液中自由基被完全清除,清除率与维生素C和芦丁相当;在纯化黄酮浓度为1.6 mg·m L-1时,还原力达到饱和。结果表明竹叶花椒黄酮提取液抗氧化能力强,并且竹叶花椒黄酮对DPPH·灵敏度较ABTS+·自由基高,所需浓度更低。研究发现黄酮与维生素C或芦丁复配后,复方抗氧化剂的抗氧化活性更强。以竹叶花椒黄酮提取物与维生素C或芦丁组成复配物,观察其对DPPH·、ABTS+·的抗氧化作用。当复配物不稀释、复配比例为1:1时,自由基清除率最高,复配物表现出较强协同作用。维生素C和黄酮提取物复配物的抗氧化能力比芦丁和黄酮提取物复配后的抗氧化能力强。
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