论文部分内容阅读
帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种神经退行性疾病,据统计,全球65岁以上人群PD的患病率超过2%,并且每年有大约60000名新的PD患者。PD的病理特征主要是位于黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNpc)的多巴胺神经元大量损伤,进而导致了纹状体(Striatum,ST)内多巴胺(Dopamine,DA)的减少。其临床特征主要表现为运动功能障碍,例如静止性震颤,肌肉强直以及姿势步态异常等。目前,对于PD的发病机制并没有一个明确的定论,研究人员发现在PD的患病进程中炎性因子的表达增加,使得研究炎症反应在PD中的作用引起人们的广泛关注。目前,使用左旋多巴(Levodopa,L-DOPA)对PD进行治疗仍然是最有效的方法,但长期使用后疗效下降,并且产生一定的副作用。桃叶珊瑚苷(Aucubin,AU)作为一种天然活性化合物,已经有研究表明,桃叶珊瑚苷的抗炎作用与其对NF-kB的抑制有关。并且,实验室前期研究发现,桃叶珊瑚苷对糖尿病引发的脑病大鼠模型的海马神经元具有一定的保护作用,其可以调控凋亡通路相关蛋白,但具体机制不是十分清楚。因此,本研究拟用桃叶珊瑚苷对MPTP(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)诱导的PD小鼠模型进行研究,探讨其对PD的神经保护作用及具体的作用机制,为桃叶珊瑚苷治疗PD提供理论依据。本文研究内容及结果如下:(1)制备MPTP亚急性PD模型。用神经毒素MPTP对C57BL/6小鼠进行PD模型制备,同时分别用不同剂量量桃叶珊瑚苷进行治疗。在造模后第1、3、5、7、14天进行行为学实验,检测运动协调能力。结果显示,桃叶珊瑚苷可以在一定程度上提高PD小鼠的运动协调能力,并且呈剂量依赖。(2)桃叶珊瑚苷对PD小鼠的神经保护作用。通过对中脑苏木素-依红染色及免疫组织化学染色发现,桃叶珊瑚苷可以通过抑制中脑的炎性细胞、以及增加内酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞,从而起到神经保护作用。并且,通过检测发现,桃叶珊瑚苷可以提高PD小鼠脑黑质(Substantia nigra,SN)及纹状体中TH的表达。(3)桃叶珊瑚苷对PD小鼠神经保护作用机制研究。通过Western blot检测NF-kB通路相关蛋白磷酸化水平的变化,并用分子对接的方法进行对接。结果显示,桃叶珊瑚苷可以特异性抑制NF-kB通路相关蛋白的活化,并且确定桃叶珊瑚苷与NF-kB的作用位点为P65的Ser276。总之,本文明确了桃叶珊瑚苷对MPTP诱导的PD小鼠的神经保护作用,并初步阐明了作用机制,为桃叶珊瑚苷治疗PD提供治疗策略。