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目的:1.探究CUDC-907对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞系的增殖影响作用。2.探究卡非佐米(Carfilzomib,CFZ)和CUDC-907单药以及联合用药后,MM细胞系的细胞周期以及凋亡变化。3.探究CFZ联合CUDC-907用药后影响细胞增殖、凋亡、周期阻滞的相关作用机制,包括凋亡、周期相关蛋白的表达变化,以及PI3K/Akt、STAT3信号通路相关蛋白的表达变化。方法:1.WST-1的方法检测CUDC-907对MM细胞系LP-1和U266的细胞增殖影响情况:以MM细胞系LP-1和U266作为研究对象,采用WST-1的方法检测CUDC-907作用于细胞株后细胞增殖的影响情况。2.流式细胞术检测CUDC-907和CFZ单药以及联合用药作用于MM细胞系LP-1和RPMI 8226后细胞凋亡水平的变化:以MM细胞系LP-1和RPMI 8226作为研究对象,采用流式细胞术的实验方法检测CUDC-907和CFZ单药以及联合用药作用于LP-1和RPMI 8226的MM细胞系后细胞凋亡水平的变化。3.流式细胞术检测CUDC-907和CFZ单药以及联合用药作用于MM细胞系LP-1和RPMI 8226后细胞周期水平的变化:以MM细胞系LP-1和RPMI 8226作为研究对象,采用细胞周期PI染色法检测CUDC-907和CFZ单药以及联合用药作用于细胞系后细胞周期的变化。4.Western Blotting法验证CUDC-907和CFZ单药以及联合用药后引起细胞增殖抑制、凋亡及细胞周期阻滞的机制研究:采用Western Blotting的方法检测CUDC-907和CFZ单药以及联合用药后LP-1和RPMI 8226 MM细胞系308p-Akt、473p-Akt、p-STAT3的表达水平及细胞周期、凋亡相关蛋白表达水平的变化。5.实验中所有数据均使用SPSS statistics 20.0统计分析软件进行相关统计学分析,P<0.05为差异具有统计学意义。实验结果相关作图采用GraphPad Prism 5进行图形分析。结果:1.CUDC-907单药对于MM细胞系有明显的细胞增殖抑制作用:CUDC-907采用0、5、10、20、50、100nM浓度作用于LP-1和U266,表现出细胞增殖抑制作用,且CUDC-907的细胞增殖抑制IC50值为10nM;而对于时间梯度来讲,CUDC-907对MM细胞系的抑制作用在24h、48h、72h无明显差异。2.CUDC-907和CFZ联合作用MM细胞系后细胞凋亡相对于单药分别作用要更加明显:分别采用CUDC907 10nM、CFZ 20nM单药和联合用药作用于MM细胞系LP-1和RPMI 8226,CUDC907、CFZ单药作用后细胞凋亡明显,CUDC907和CFZ联合用药后MM细胞的凋亡尤为明显,且有统计学差异(P<0.05)。3.CUDC-907和CFZ作用MM细胞系后细胞周期阻滞相对于单药分别作用要更加明显:分别采用CUDC907 10nM、CFZ 20nM单药和联合用药作用于LP-1和RPMI8226细胞株,CUDC-907、CFZ单药作用后有一定的细胞周期阻滞作用,CUDC-907与CFZ两药联合作用后,使MM细胞系G1期阻滞更明显,进而抑制MM细胞系的增殖,且具有统计学差异(P<0.05)。4.CUDC-907、CFZ单药和两药联合用药后MM细胞的增殖受抑的相关机制可能与STAT3信号通路相关:分别采用CUDC-907、CFZ联合用药作用于LP-1和RPMI 8226细胞株,p-akt473及p-akt308表达水平均无明显变化,p-STAT3在联合用药组表达量明显下调;细胞周期相关蛋白P21表达水平在联合用药组明显上调;抗细胞凋亡相关蛋白C-myc表达水平明显下调,促细胞凋亡相关蛋白smac联合用药组表达量明显上调。结论:CUDC-907单药对于MM细胞株有明显的细胞增殖抑制作用,且作用机制可能与STAT3信号通路作用相关,与Akt信号通路作用关系不大;CUDC-907以及CFZ单药可以引起MM细胞周期阻滞及细胞凋亡,CUDC-907和CFZ联合用药组MM细胞周期阻滞及细胞凋亡尤为明显。细胞周期相关蛋白P21表达水平在联合用药组明显上调,进而引起MM细胞系的细胞周期阻滞;抗细胞凋亡相关蛋白C-myc联合用药组表达量下调,促细胞凋亡相关蛋白smac联合用药组表达量明显上调,进而引起MM细胞的凋亡。