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目的: 通过观察急性病毒性心肌炎BALB/c小鼠的生存率、心脏组织残余病毒RNA水平、血清CK-MB、LDH水平,并结合心脏组织病理学改变,探讨法舒地尔对CVB3诱导急性病毒性心肌炎小鼠的影响。 方法: 体内实验,54只成年BALB/c小鼠(4-6周,上海莱斯克动物中心提供)随机分为3组: (1)A:空白对照组(Control group,n=18); (2)B:病毒性心肌炎组(VMC group,n=18); (3)C:病毒性心肌炎+法舒地尔治疗组(VMC+Fasudil group,n=18)。各组按治疗时间不同分为7日治疗组与14日生存率组两个亚组。B、C组于腹腔接种5×106pfu CVB3,A组注射等量DMEM作为对照,C组于2小时后腹腔注射给予法舒地尔(10mg/kg/day),一天一次,连续给药7-14天,A、B两组注射等量注射用水作为对照。每日记录小鼠体重、体貌、行为改变,于第7天收取心脏组织,血液,通过心脏病理切片观察各组心肌炎症浸润程度, RT-PCR检测炎症指标 IL-17 水平及心肌病毒 mRNA 水平,检测血清中 LDH、CK 水平。于第 14天观察小鼠生存率。体外实验,法舒地尔刺激RAW 264.7细胞后,分别给予Green 25nm荧光微珠及5MOI CVB后,观察其吞噬功能变化。 结果: 1.小鼠基础指标显示:A 组小鼠体重不降反升,B、C 组体重明显下降,B、C 组间差异无统计学意义。B、C 组小鼠自第 3 天起毛发开始出现凌乱、无光泽,活动明显减少,A组无明显变化。 2.病理组织学:A组心脏表面光滑红润,切片示心肌细胞排列未见明显病理改变。B组心脏表面有大量白色点状、条状、斑片状心外膜炎表现,颜色较深,切片示心肌细胞肿胀,横纹模糊,病灶四周有大量淋巴细胞以及单核细胞为主的炎性细胞浸润,结合小鼠行为学表现,模型建立成功。C 组较 B 组心外膜炎表现减轻,切片中心肌细胞周围炎性浸润较B组有所减轻,炎症评分下降,P<0.05。 3. 实时荧光定量PCR检测IL-17 mRNA水平显示:B组IL-17水平较A组显著上升,C组IL-17水平较A组升高,较B组显著降低,P<0.05。 4.实时荧光定量PCR检测病毒mRNA显示:A组心肌中未检测到病毒mRNA;以B组心肌中病毒mRNA水平为参照,C组心肌中病毒mRNA水平显著下降,P<0.05。 5.用LDH、CK微量检测试剂盒检测血清,结果显示:B组LDH、CK水平较A组显著上升,C组LDH、CK水平较A组升高,较B组显著降低,P<0.05。 6.小鼠14天生存率显示:A组小鼠全部存活,B组生存率为8.3%,C组生存率为58.3%,差异有统计学意义,P<0.05。 7.体外实验中,经法舒地尔处理后RAW 264.7细胞内病毒RNA水平较未处理组显著上升,P<0.05。荧光显微镜下观察Green 25nm荧光微珠吞噬强度,经法舒地尔处理后RAW 264.7细胞荧光强度较未处理组显著上升,P<0.05 结论: CVB3诱导急性病毒性心肌炎小鼠心脏组织病毒mRNA水平、血清CK、LDH浓度升高,法舒地尔能降低其升高幅度,改善小鼠生存率,其机制可能为通过抑制Rho/ROCK 通路,增强巨噬细胞吞噬作用,降低早期病毒水平,减轻病毒负荷,对急性病毒性心肌炎小鼠起保护作用。