细胞分裂素6-BA影响三裂叶野葛毛状根生长及其异黄酮产生的机理研究

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本文研究了外源细胞分裂素6-BA以及6-BA添加AgNO3或NAA对三裂叶野葛毛状根生长及其次生代谢物异黄酮化合物产生的影响及其毛状根培养过程中可溶性蛋白和MDA含量以及SOD、POD酶活性等的变化。所得结果如下: 培养基中添加细胞分裂素6-BA能抑制三裂叶野葛毛状根的生长,且培养基中6-BA浓度越大其抑制作用越明显;6-BA可以提高毛状根异黄酮类化合物的含量,培养至30d时,添加0.1mg/L、O.5mg/L、1.0mg/L、3.0mg/L和5.Omg/L6-BA培养的毛状根的异黄酮类化合物含量分别是对照培养的1.19倍、1.67倍、1.75倍、1.69倍和1.73倍。6-BA可以延缓毛状根中可溶性蛋白含量的降低,明显提高毛状根中SOD和POD酶活性,同时提高MDA含量,促进毛状根的褐化。毛状根DNA的琼脂糖凝胶电泳检测表明,培养至30d时,高浓度6-BA(3.Omg/L和5.Omg/L)培养的毛状根中已开始出现明显的DNAladder条带。 与对照(只加AgNO3)相比,不同浓度6-BA和AgNO3组合可以抑制毛状根的生长,在AgNO3浓度为30μmol/L条件下,6-BA浓度越大,其抑制作用越明显。6-BA和AgNO3结合可以不同程度的提高毛状根中异黄酮类化合物的积累量,尤以6-BA5.Omg/L和AgN0330μmol/L的效果最好。6-BA和AgNO3结合可以延缓毛状根中可溶性蛋白含量的降低,同时降低毛状根中SOD和POD酶活性,促进MDA的生成,使毛状根的褐化较单独添加细胞分裂素6-BA更提前。琼脂糖凝胶电泳表明,在毛状根培养至20d时,可以看到DNAladder,到30d时则更加明显。 培养基中不同浓度6-BA和NAA(2.Omg/L)组合可以抑制毛状根的生长,且6-BA浓度越高抑制作用越明显,同时6-BA和NAA结合可以促进毛状根每克干物质中异黄酮类化合物的积累,且6-BA浓度越大效果越明显,在培养至25d时,6-BA5.Omg/L和NAA2.Omg/L培养的毛状根中异黄酮类化合物含量达到最大,约为19.76mg/gDW。毛状根中异黄酮类化合物的积累与毛状根的生长不同步。6-BA和NAA结合能明显提高毛状根中POD酶活性,但降低SOD酶活性和MDA含量,促进毛状根的褐化。琼脂糖凝胶电泳检测发现,在三裂叶野葛毛状根培养至25d时,仍可以明显观察到DNAladder条带。
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