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目的:采用蛋白组学双向凝胶电泳技术分离血清蛋白,筛选其中的差异蛋白点,运用基质辅助激光解析飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)对差异点进行鉴定,分析正常软骨和损伤软骨中的血清蛋白差异点,寻找骨髓间充质干细胞迁移修复软骨损伤的血清标志物。方法:准备健康成年新西兰大白兔20只,随机分为损伤组和对照组,在损伤组股骨外髁前中1/3处用钻头钻一直径4mm,深约3mm的孔,造成一个累及软骨下骨的全层关节软骨损伤,分别于损伤后2W、4W收集损伤组和对照组血清组成3组样本。去除血清中高丰度蛋白,运用双向凝胶电泳技术分离血清蛋白,筛选其中的差异蛋白点,运用基质辅助激光解析飞行时间质谱技术对差异点进行分析鉴定。结果:通过去除血清中高丰度蛋白,优化双向凝胶电泳技术,获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的凝胶图谱。图像分析发现20个差异蛋白点,经质谱分析成功鉴定出7个差异蛋白,分别是结合珠蛋白、补体B因子、补体C1q、丛生蛋白前体、β-珠蛋白和α-1抗蛋白酶E前体。结论:通过血清蛋白质组学技术,获得了较好的双向凝胶电泳图谱。发现了关节软骨损伤和正常关节软骨血清中的差异蛋白点,这些差异蛋白点可能成为骨髓间充质干细胞迁移修复软骨损伤的血清标志物。