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本文系统介绍了制备型体积排阻电色谱和离子交换电色谱中一种新型的横向交变外电场引入技术,电场施加在色谱柱的横向,也就是电力线垂直于柱内的压力流线。因此,在色谱柱的轴向,液相由压力驱动;在色谱柱的横向,荷电溶质产生横向的电动传递。本文主要研究其在蛋白质色谱分离中的应用。在体积排阻电色谱(PSEEC)中,系统研究了蛋白质(BSA、Myo)在Sephadex G-75中的保留行为。电场、缓冲液等实验条件都因影响蛋白质的电泳迁移而影响其保留行为。荷电蛋白质的分配系数随电场强度的增大而增大,也随缓冲液pH和蛋白质等电点之间差异的增大而增大。对于被凝胶排除的生物大分子(如BSA),浓差极化现象是其分配系数增大的主要原因;对于凝胶渗透的较小蛋白质(如Myo),除浓差极化外,静止相内的电泳对流是其分配系数增大的主要原因。另外,荷电的蛋白质大分子既发生浓差极化又发生孔内的电泳对流,使传质现象变得更为复杂。流动相的离子强度和电场强度等通过影响蛋白质的电泳速度而影响其传质行为。在PSEEC中,实验研究了不同类型的二元蛋白质混合物(IgG/ BSA、Myo/Lys、BSA/Myo等)和一种三元蛋白质混合物(BSA/Myo/Lys)在Sephadex G-75中的分离行为,根据蛋白质等电点的差异分离那些在常规体积排阻色谱(SEC)中无法分离的蛋白质(如IgG/BSA、Myo/Lys);对于在SEC中能得到部分分离的蛋白质混合物(如BSA/Myo),在PSEEC中可以增大其分离度和提高样品处理量。在离子交换电色谱中(PIEEC),利用电动传递现象(电渗、电泳)来强化介质颗粒间/颗粒孔内传质。在分别含5.0,12.5 mmol/L NaCl的Tris- Gly缓冲液(pH8.2)中,实验研究了不同电场强度下BSA在DEAE Sepharose FF上的动态吸附行为,结果表明蛋白质的动态吸附容量随电场强度的增大而线性增大,说明离子交换介质孔内的贯穿电渗流和蛋白质的电泳对流是引起动态吸附容量增大的主要原因。另外,还研究了电流交变周期、流速、柱高等对动态吸附容量的影响。最后,采用PIEEC分离BSA/IgG取得较好的分离效果而样品处理量得到了显著提高。