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双抗夹心免疫反应中一抗的固定对检测的灵敏度有着重要的影响,一直是人们研究的热点。金纳米粒子具有能够稳定地固定生物分子,同时保持它们生物活性的优点。本论文成功构建了以PDMS/金纳米粒子复合材料及Au/chitosan/Fe3O4磁性复合纳米粒子为固定载体的双抗夹心免疫分析法,可分别测定HBAlc和小鼠IgG的含量。 具体内容如下: 1、利用一种简单的原位合成方法制备PDMS/金纳米粒子复合材料。该方法利用了PDMS材料自身的网络结构和还原型基团,不需要外加还原剂和稳定剂。将原位合成的金纳米粒子用于抗糖化血红蛋白抗体(anti-HbAlc antibody)的固定,并用双抗夹心法来完成糖化血红蛋白(HBAlc)的检测。结果表明,在1~100μg/mL浓度范围内存在线性,A=0.512+1.54×10-3×CHBAlc(R=0.985)。 2、采用溶剂热还原法,成功地制备了大小均匀的球形Fe3O4纳米颗粒。制得的Fe3O4纳米粒子粒径约为250nm,分散性较好。将所得Fe3O4颗粒作为磁性内核,壳聚糖为包裹材料,采用反相悬浮交联法,以液体石蜡为油相,醋酸溶液为水相,戊二醛为交联剂,制备chitosan/Fe3O4复合磁性纳米粒子。在该壳核结构外进一步自组装一层Au纳米粒子形成Au/chitosan/Fe3O4复合纳米粒子,该复合纳米粒子具有超顺磁性。利用复合纳米粒子来固定兔抗小鼠IgG抗体,实现对小鼠IgG的双抗夹心法检测。结果表明,小鼠IgG含量在0.5~10μg/mL之间有较好的线性关系(R=0.991, n=6)。