伴随着规模化养牛产业的迅速发展,奶牛疾病已经给世界畜牧业造成了严重的经济损失。尤其是犊牛的肠炎和腹泻,成为一些牛场的最主要疾病。一些技术储备不足的牛场,犊牛死亡率高达50%～70%,其中腹泻占到80%以上。生产中采用抗生素等传统治疗方法控制腹泻,不仅造成耐药菌株的增加和药物的毒副作用,而且容易引起滥用抗生素所致的菌群失调。为避免抗生素相关性腹泻和细菌耐药性,同时提高犊牛生产效率,本研究运用动物微生态学理论及方法,研制由复合益生菌和黄芪多糖相结合的合生元制剂,用于防治初生犊牛腹泻。获得了以下结果:1对实验室保存的2株益生菌进行了生化试验鉴定及其生物学特性分析,检测结果表明该益生菌分别为短乳杆菌及蜡样芽孢杆菌。生长曲线测定结果显示短乳杆菌和蜡样芽孢杆菌培养2 h～8 h达到对数生长期,最佳接种龄是8 h。短乳杆菌的耐受条件检测结果为:pH 4.0,胆盐浓度(W/V)0.1%,温度45℃;蜡样芽孢杆菌的耐受条件检测结果为:pH 2.0,胆盐浓度(W/V)0.3%,温度65℃。2根据黄芪多糖对益生菌增殖促进作用,确定益生菌和黄芪多糖的最适组合比例为:短乳杆菌(1×10~9 cfu /mL)添加0.25 mg黄芪多糖;蜡样芽孢杆菌(1×10~9 cfu/mL)添加0.5 mg黄芪多糖。根据益生菌的不同生物学特性,研制了蜡样芽孢杆菌-黄芪多糖菌粉和短乳杆菌-黄芪多糖微胶囊。研制的微胶囊配方为:海藻酸钠20 g/L,氯化钙30 g/L,菌液(m):海藻酸钠(m)=1:3,壳聚糖20 g/L。对微胶囊的特性及耐受性检测结果表明:粒径为227μm,能耐受85℃高温;在人工胃液(pH 2.5)中处理90 min不崩解,短乳杆菌存活率为47%,活菌数达到108 cfu/g以上;在人工肠液(pH 6.8)中处理60 min,微胶囊全部崩解释放出活性菌。稳定性检测结果表明:菌粉与微胶囊在恒温37℃、相对湿度(RH)60%～65%条件下加速保存3个月(相当于常温下保存一年以上),短乳杆菌活菌数在108 cfu /g以上,蜡样芽孢杆菌活菌数在109 cfu /g以上,存活率均在10%以上,表明制备的活菌制剂保存性良好。3利用ERIC-PCR技术,分析研制的益生菌-黄芪多糖合生元制剂对腹泻犊牛肠道菌群结构变化的影响。结果显示,发生腹泻犊牛投服本制剂前,粪样中的ERIC-PCR扩增条带数量较相近日龄健康犊牛明显减少,且优势条带消失,条带位置均有显著变化。提示发生腹泻犊牛肠道菌群结构发生了剧烈的改变。投服本制剂后,粪样中的ERIC-PCR条带数量逐渐增多,且电泳图谱与健康犊牛相似性较高。这表明,自制的益生菌-黄芪多糖合生元对重新构建腹泻犊牛肠道菌群结构平衡效果明显。