丹酚酸B的分离纯化及稳定性研究

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本文对丹参药材中水溶性成分进行纯化,通过醇水提取,D101大孔树脂分离,聚酰胺柱纯化三步得到纯度达到95%以上的丹酚酸B样品。对丹酚酸B的分离纯化工艺进行了考察,确定最佳纯化条件。分别对丹酚酸B的热稳定性,光稳定性及pH稳定性进行了考察,确定了丹酚酸B在低温,低pH值,避光为最佳保存条件。为得到更多的丹酚酸类化合物,对丹酚酸B的水解进行了研究,分别对丹酚酸B进行酸水解,碱水解及高温降解。建立了酸水解,碱水解产物与高温降解产物的TLC及HPLC检测方法。确定了酸水解,碱水解及高温降解的条件并分离得到了部分酸水解产物与高温降解产物。实验中发现酸水解及高温降解均可产生多种水解产物,酸水解产物比较复杂,从酸水解产物中分离出一种化合物,经鉴定后为丹参素。高温降解的方法制备得到多种丹酚酸类化合物,通过HPLC-UV及MS分析得出几种水解产物分别为:丹参素,原儿查醛,丹酚酸D,丹酚酸A,紫草酸。研究了这几种产物在降解过程中的变化趋势,发现丹参素,原儿查醛为终产物,在降解过程中,含量一直增高。丹酚酸D,A,紫草酸为中间产物,降解过程中三个中间产物的变化趋势为先升高后降低。碱水解产物初步确定为紫草酸,丹参素钠,丹酚酸D。以丹酚酸B为底物,用二级发酵法得到的菌丝体进行微生物转化的初步研究,从10株丝状真菌中筛选得到一株3.2004刺孢小克银汉霉能够转化丹酚酸B。
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