硬组织切片技术应用于三种大动物TMJ形态与组织结构观测的实验研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zjcamel
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[目的]本实验应用硬组织切片技术对比格犬、滇南小型猪、山羊三种大动物的颞下颌关节进行比较研究。通过对未经未脱钙处理的TMJ结构分别进行解剖观测、影像测量、番红0-固绿染色、甲苯胺蓝染色、胶原纤维染色,比较三种动物的TMJ形态结构和组织结构的异同,完善大动物颞下颌关节的研究资料,为颞下颌关节疾病基础研究选择模型动物提供理论依据。[方法]通过解剖学研究方法收集成年健康、头颅发育正常的比格犬、滇南小耳猪、山羊尸头各2个。拍摄CT进行影像学观察,对比双侧髁突形态是否一致,有无先天骨质缺损,矢状位上是否存在关节间隙并测量前、上、后间隙宽度,冠状位上测量内外两侧上下斜面交角;对颞下颌关节进行大体解剖观察比较,使用游标卡尺测量髁突前后径及内外径,髁突表面骨性隆突长宽,髁突各边缘长度,关节盘前后径及内外径。使用角度尺测量髁突前后斜面交角,以髁突软骨覆盖最低点的连线为基准平面,测量髁突前后斜面与基准平面的交角。使用厚度测量尺测量关节盘边缘厚度,中央区域厚度;应用image pro plus软件测量髁突表面积;应用硬组织切片技术制作连续组织切片并应用番红0-固绿、甲苯胺蓝、胶原纤维、弹力纤维染色法观察3种动物颞下颌关节内关节盘、髁突软骨的细胞组成及排列特点。观察是否存在关节表面带、增殖带、纤维软骨带、钙化软骨带并比较它们之间的异同。[结果]1.CT影像测量关节间隙:比格犬关节前间隙为0.88mm、关节上间隙为0.75mm、关节后间隙为0.93mm。滇南小耳猪关节前间隙为1.57mm、关节上间隙为0.89mm、关节后间隙为1.20mm。山羊关节前间隙为1.65mm、关节上间隙为1.70mm、关节后间隙为1.77mm。2.解剖形态学结果:比格犬、滇南小耳猪、山羊的颞下颌关节均由上方的关节窝及关节结节,下方的下颌骨髁突,居于两者中间的关节盘以及外侧包绕的关节囊构成,颞下颌关节整体结构具有相似性。3.比格犬TMJ各部结构观测结果:髁突内外径长约为17.04mm,前后径宽度为10.04mm。髁突上表面似梭型面积约为103.14mm2。髁突前斜面和后斜面的交角为135度,前后斜面软骨覆盖最低点连线的交角为65度。髁突颈部宽2.80mm。关节盘内外径长度为18.04mm,关节盘最大前后径为11.74mm,高度为9.54mm。关节盘近似成椭圆形,面积为252.74mm2,关节盘中央成类圆形透明状,厚度极薄约为0.25mm,前后径为为7.14mm,内外径为11.02mm,环形边缘较厚,厚度为1.48mm。关节窝成马蹄形容纳关节,为颧骨末端与颞骨关节面构成,关节窝宽度为13.14mm,关节窝高度为2.20mm。,内侧中央部成凹陷穿行牵拉关节盘的韧带,凹陷宽度为4.9mm,关节窝前斜面宽度为5.80mm,关节窝后斜面宽度为 7.34mm。4.滇南小耳猪TMJ各部结构观测结果:髁突内外径为24.42mm,髁突前后径为29.10mm,髁突上表类似梭型面积约为466.273mm2。髁突前斜面和髁突后斜面的交角为118度,髁突前斜面和髁突前后斜面覆盖软骨最低点连线的交角为53度。髁突后侧覆盖脂肪组织,其长度为3.70mm,最大宽度为11.78mm。内侧有关节囊附着,其长度为11.80mm,宽度为2mm。关节盘为一前宽后窄的类椭圆形,最大前后径为24.42mm,最大内外径及关节盘前斜面内外径,前斜面宽度为15.20mm,后斜面宽度为14.70mm。关节盘表面积为510.675mm2。关节窝前斜面为一椭圆形,其前后径为20.60mm,内外径为20.20mm。5.山羊TMJ各部结构观测结果:髁突内外径为22.10mm,髁突前后径为11.92mm。髁突关节面的面积约为228.983mm2,髁突的后斜面位于髁突的后内侧1/3处,该区域长度为7.10mm,宽度为3.70mm。髁突前斜面与髁突后斜面的交角为62度。髁突前斜面与髁突前后斜面覆盖软骨最低点连线的交角为27度,未见明显的髁突颈部缩窄。关节盘分为前后两个斜面最大内外径长度为22.00mm,前后径为10.40mm,中央嵴长度为17.10mm,厚度为1.00mm,中央透明带自关节盘前斜面延伸至关节盘后斜面,总长度约为19.58mm,该区域在关节盘后斜面和前斜面外1/3处最为宽大。关节盘面积约为252.74mm2。关节窝可分为前后两个斜面,前斜面内外径为23.84mm,前后径为18.10mm,关节结节后斜面位于关节窝内1/3处,内外径为9.12mm,前后径4.82mm。6.组织结构:关节盘均含有大量胶原纤维,相互交织成网。三种动物髁突表面均覆盖有软骨,软骨分层明显,可分为:关节表面带、增殖带、纤维软骨带、钙化软骨带。比格犬髁突软骨增殖带较窄。滇南小耳猪髁突软骨前、中份细胞分层明显,后份细胞排列混杂没有明显分层。山羊髁突软骨前、中份细胞分层较其它两种动物更为明显,细胞间距小排列成条状,各层结构排列规则,后份细胞成片状分布,增殖带、纤维软骨带增宽,细胞间距增大。三种动物髁突软骨均含有胶原纤维。比格犬髁突软骨胶原纤维内外向走行及前后向走行相互交织成网,后份胶原纤维含量大于前、中份。滇南小耳猪髁突软骨胶原纤维内外向走行为主,同前后向走行的胶原纤维交织成网,中份胶原纤维含量较多。山羊髁突软骨胶原纤维前后向走行为主,同内外向走行的胶原纤维交织成网。比格犬髁突软骨中未发现弹力纤维。滇南小耳猪髁突软骨前、中、后份均含有弹力纤维,且中份含量最多。山羊髁突软骨软骨前、中、后份均含有弹力纤维,且含量未见明显差异。[结论]1.硬组织切片技术确保了大动物颞下颌关节结构的完整性,番红O-固绿染色、甲苯胺蓝染色、胶原纤维染色、弹力纤维染色应用于颞下颌关节硬组织切片有利于整体观察TMJ的组织结构。2.三种大动物的颞下颌关节解剖结构相似,比格犬的关节窝形态、关节盘髁突软骨与滇南小耳猪和山羊的差异较大。3.三种动物髁突均为梭型,髁突软骨细胞分层排列,各层结构规则与人的髁突软骨细胞分层相似。滇南小耳猪、山羊髁突软骨含有弹力纤维。4.三种动物关节盘均由大量胶原纤维相互交织成网状。5.比格犬的颞下颌关节结构与人类颞下颌关节的相似性最好,可作为颞下颌关节骨关节炎的建模动物
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