随着社会经济的不断发展,人们物质生活水平的不断提高,肥胖成为当今社会常见和多发性疾病,也是世界卫生组织确定的疑难性疾病之一。我国城市有10%-15%的发病率,而且有逐年上升和年轻化的趋势,寻找高效的降脂药物已成为医学界的共同愿望。目前市场上有品种繁多的降脂减肥药,而且不断有新的药物问世,但大都是化学制剂,有的药物能明显地带来一些毒副作用,例如会产生不同程度的肝损伤,有的合成类药物毒副性小,但效果不佳。肥胖高脂血症者需要终身服药治疗,因此越来越多的人把目光投向天然降脂减肥药的开发和利用。茶叶作为一种天然的饮料,有着几千年的饮用历史。现代研究结果证明茶叶有很好的降脂减肥效果,未发现有任何毒副作用,有不少茶学界和医学界的科学工作者都在此领域作了细致的研究。而乌龙茶作为一种半发酵型的茶叶,在各种研究报道中都有着显著的降脂减肥作用。本论文以提取的乌龙茶多酚及儿茶素单体EGCG和EGCG3"Me为研究样品,对乌龙茶多酚的降脂减肥作用进行了研究。通过研究对营养肥胖型大鼠的降脂减肥作用、与α-淀粉酶的相互作用以及对3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化的抑制作用,证明了乌龙茶多酚及其儿茶素单体的降脂减肥作用。1.乌龙茶多酚及其儿茶素单体的分离及纯化。从特定品种的乌龙茶中,分离纯化得到以酯型儿茶素为主的茶多酚混合物、EGCG单体及EGCG3"Me单体。选取适当的大孔树脂吸附乌龙茶多酚,用水冲洗去除咖啡碱后,乙醇解吸附,可得到纯度较高的以酯型儿茶素为主的茶多酚混合物。再对茶多酚混合物上样,过特定的大孔树脂,以乙醇洗脱并分部收集,即可得到纯度大于95%的EGCG和EGCG3"Me单体。2.乌龙茶多酚对营养型肥胖大鼠的降脂减肥作用。以茶多酚为样品,研究乌龙茶多酚对营养型肥胖大鼠的降脂减肥作用。体重约50g的SD大鼠,随机分组为正常对照组、肥胖对照组和乌龙茶组。正常对照组以普通饲料喂养,肥胖对照组和乌龙茶组以高脂饲料喂养。同时对乌龙茶组大鼠灌胃给样,正常对照组和肥胖对照组灌蒸馏水对照。7周后宰杀取血清和肝组织。测定血脂四项(TC.、TG、HDL-C和LDL-C)、脂肪酶、SOD酶及MDA等指标。经实验结果表明,乌龙茶多酚能明显改善肥胖大鼠的各种生化指标,使其虽每天食用高脂饲料,但各项指标均好于肥胖对照组,接近于正常对照组的大鼠状态,证明其具有明显的降脂减肥功效。3.乌龙茶多酚与α-淀粉酶的相互作用。以乌龙茶多酚、EGCG和EGCG3"Me单体为样品,研究其对α-淀粉酶活性的抑制作用和样品与a-淀粉酶相互作用后的紫外和荧光猝灭作用。通过DNS法测定麦芽糖含量间接测定了a-淀粉酶的活性,以及样品抑制剂对α-淀粉酶活性的抑制率和抑制类型等。确定了乌龙茶多酚和EGCG对a-淀粉酶的抑制作用均为竞争性抑制,而EGCG3"Me为非竞争性抑制。在紫外分光光度计测定下,三种样品对α-淀粉酶的作用均能使其产生结构的变化,发生红移。通过荧光分光光度计,分析了α-淀粉酶的3D荧光图谱和加入样品后对α-淀粉酶结构的影响,进一步分析了样品对酶的猝灭作用类型等。其结果表明,三种样品均有良好的对α-淀粉酶的抑制作用和猝灭作用。4.乌龙茶多酚对3T3-L1前体脂肪细胞的增殖和分化的抑制作用。主要研究的是茶多酚混合物、EGCG和EGCG3"Me单体对3T3-L1细胞的增殖和分化的抑制作用。通过对细胞的培养及MTT实验,测定了三种样品分别在处理24h、48h、72h和96h后的增殖情况。并通过加入胰岛素、DEX和IBMX诱导细胞分化为脂肪细胞的同时加入样品,来检测样品能否抑制前体脂肪细胞向脂肪细胞的转化,以及对已经分化的脂肪细胞内脂肪含量的影响。经实验证明,三种样品对3T3-L1前体脂肪细胞的增殖和分化均有较好的抑制作用。