蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新的研究领域，它是对机体、组织或细胞的全部蛋白质的表达和功能模式进行研究。对蛋白质组的研究可以使我们更容易接近对生命过程的认识。因此，绘制蛋白质相互作用连锁图可以为蛋白质功能提供更多的新视角。酵母双杂交系统是鉴定蛋白质相互作用的有力工具。它适用于高通量探测一个组织的整个蛋白质组中的蛋白质间相互作用。中国人类肝脏蛋白质组计划(CNHLPP,ChinaHumanLiverProteomeProject)是一具有重大意义的工程，它致力于研究人类肝脏中蛋白质之间的相互作用。本论文的工作就是这项计划的一部分。 本实验室已将猎物载体质粒pPC86改造为新的猎物载体pHBM86，使用前将pHBM86用BglⅡ、NotⅠ双酶切处理。设计含有与载体同源9bp的序列及相应酶切位点序列6bp(共15bp)引物，利用PCR技术将3313个人肝蛋白质cDNA从模板上扩增下来，通过无酶克隆方式从克隆到猎物载体pHBM86，得到3313个重组猎物质粒。并且对重组质粒进行酶切和PCR验证。 将3313个重组猎物质粒混合，得到人肝蛋白质cDNA的全长有限文库。将本实验室保存的160个诱饵质粒用酵母一步法转化的方式转入啤酒酵母(Saccharomycescerevisiae)Mav203中，涂布SC-Leu固体选择平板，得到重组啤酒酵母Mav203(pDBLeu-X)，然后再用人肝蛋白质cDNA的全长有限文库二次转化重组啤酒酵母Mav203(pDBLeu-X)，涂布SC-3筛选平板，得到重组啤酒酵母Mav203(pDBLeu-X)(pHBM86-Y)。经SC-4平板划线，LacZ显色反应验证得到确定的蛋白质相互作用对。