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脊髓灰质炎病毒属于微小RNA病毒科,肠道病毒属。其感染宿主细胞后的活动完全在细胞质内进行,比如病毒基因组的复制,蛋白的合成以及病毒的包装等。然而这并不代表脊髓灰质炎病毒和宿主细胞核完全没有相互作用。事实上,病毒的一些蛋白可以定位于细胞核并与核内因子相互作用,而宿主细胞核内的某些因子也会重新定位于细胞质参与病毒的扩增过程。
在脊髓灰质炎病毒感染宿主细胞的过程中,细胞内的某些蛋白的核质定位会发生变化。本文主要应用融合荧光蛋白示踪的方法对脊髓灰质炎病毒3CD、3C’蛋白核质定位的改变进行了研究,发现单独表达时为细胞质定位的3CD、3C’蛋白在病毒感染或与2A蛋白酶(2Apro)共表达时,变为明显的核定位,说明2Apn。是引起3CD、3C’核质定位改变的原因,并用点突变的方法证明在此过程中2Apro必须保持其酶活性,同时发现2Apro定位于细胞核膜。进一步的研究发现,2Apro可以与核孔复合物蛋白Nup153共定位于环孔片层结构(AL)中,为2Apro与核孔复合物存在相互作用提供了证据。
在发现2Apro影响病毒蛋白3CD,3C’的核质定位的基础上,本论文进一步研究了2Apro对其他核定位蛋白的影响。结果发现由HIV REV或TAT蛋白核定位信号(NLS,Nuclear Localization Signal)介导的直接使用importinβ途径的蛋白入核过程会受到2Apro的抑制,而猪细小病毒VP2蛋白的入核过程却不受抑制,从而说明2Apro对不同的入核途径的影响不同。另外,本论文也对猪细小病毒VP2入核的机理作了初步研究,鉴定出VP2蛋白核定位信号的核心序列为KGTLTFTAKMR。
综上,本论文发现脊髓灰质炎病毒及其2Apro对多种蛋白亚细胞定位的影响并初步分析了其作用机制。该研究将有助于深入理解脊髓灰质炎病毒侵染过程中病毒蛋白与宿主细胞核相互作用的过程与机制,并为其他肠道病毒的类似过程提供参考。