目的：建立鼠角膜缘干细胞体外培养方法。了解全反式维甲酸(RA)对鼠角膜缘干细胞分化为神经干细胞样细胞的影响。探讨体外诱导鼠角膜缘干细胞分化为神经干细胞样细胞的可行性。　　方法：　　（1）角膜缘干细胞分离、培养与鉴定：取大鼠角膜缘组织消化法进行原代培养（基本培养基为20％FBS，80%DMEM/F12，PS100U/ml），倒置显微镜下观察培养细胞的体外生长状况，隔天半量换液且传代，培养第七天（传代培养第5天），免疫细胞化学检测角膜缘干细胞标志物P63蛋白表达情况，鉴定角膜缘干细胞；　　（2）角膜缘干细胞的诱导分化：将原代细胞按诱导体系中诱导因素的不同分为3组，对照组：细胞培养液为基本培养基（20%FBS，80%DMEM/F12，PS100U/ml）；实验组1：在基本培养基中加入EGF(20ng/ml)，bFGF(10ng/ml)；实验组2：在基本培养基中加入EGF(20ng/ml)，bFGF(10ng/ml)，培养至第5天，再加入RA(25ng/ml)，继续培养48小时；三组均隔天半量换液且传代，培养至第7天（实验组2加入RA48小时后），同时收集各组细胞作神经元标志物Nestin的免疫细胞化学检测，阳性细胞计数，相关数据作统计学分析。　　结果：　　（1）角膜缘干细胞分离、培养与鉴定：第三天可见细胞形成许多小集落，集落细胞呈圆球形；培养第七天（传代培养第5天），细胞形成较大的集落，免疫细胞化学结果显示：P63阳性细胞数量多，占细胞数的（82.19±5.32）%。　　（2）角膜缘干细胞的诱导分化：分组诱导培养第7天，实验组1和实验组2培养细胞Nestin均呈阳性表达，阳性率分别为（77.01士6.32）%和（84.01士5.43）%，对照组培养细胞Nestin呈阴性表达。统计学分析证实，实验组2和实验组1相比，实验组2鼠角膜缘干细胞转分化为神经干细胞样细胞的比率高于实验组1。　　结论：　　（1）消化法适用于鼠角膜缘干细胞的体外培养。　　（2）体外诱导鼠角膜缘干细胞分化为神经干细胞样细胞是可行的。　　（3）RA可有效促进鼠角膜缘干细胞向神经干细胞样细胞分化。