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番茄是重要的蔬果栽培品种。番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)属于双生病毒科菜豆金色花叶病毒属,由烟粉虱传播,其引发的番茄黄化曲叶病毒病会造成番茄的大量减产。培育抗病品种是控制番茄黄化曲叶病毒病的最佳途径。RNAi技术因其高效性、特异性、可遗传性和生物安全性成为最受关注的抗病育种方法之一。本研究选择病毒基因组上的三个保守基因片段C1、C2和C1C2,检测其转基因番茄对TYLCV的抗性。将3个片段分别以正反两向连接到载体pFGC5941中内含子两端,成功构建抗TYLCV的RNAi载体pFGC5941-FC1-RC1、pFGC5941-FC2-RC2和pFGC5941-FC1C2-RC1C2。将pFGC5941-FC1-RC1、pFGC5941-FC2-RC2和pFGC5941-FC1C2-RC1C2三个RNAi载体分别转化到农杆菌GV3101中,用于农杆菌侵染实验。用携带RNAi载体的农杆菌侵染2-3叶期的番茄幼苗;20d后,用携带TYLCV全基因组的侵染质粒通过农杆菌介导侵染番茄植株,通过对番茄植株发病症状的观察和对病毒DNA的扩增,检测3个片段的抗病效果。结果显示,三个片段都可以引起siRNA的机制,抑制或减弱TYLCV基因在植株中的积累,使植株抗病,转化的C2片段被证实是引发TYLCV抗性的最合适片段,抗病率达到87.5%。对番茄再生体系的研究表明,子叶为番茄组织再生培养的最佳外植体,其愈伤诱导率和不定芽的诱导率均高于下胚轴;诱导子叶外植体愈伤组织和不定芽分化的最适培养基为MS+0.2mg/L IAA+1.0mg/L6-BA,而诱导下胚轴外植体愈伤组织和不定芽分化的最适培养基为MS+0.5mg/L IAA+1.0mg/L6-BA,诱导不定芽生根的最佳培养基为MS+0.1mg/L IAA;对农杆菌介导的番茄转化实验条件进行摸索,结果表明农杆菌浓度为OD600=0.2时,转化番茄的最佳条件为农杆菌侵染20min(子叶外植体,出芽率为33.3%)或30min(下胚轴外植体,出芽率为23.3%)后共培养2d。