MicroRNA-92a通过降解noggin3调控斑马鱼咽部软骨发育

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颅面畸形通常是由于硬骨、软骨等发育异常而导致的颅部、面部以及咽的结构紊乱,是一类常见的胎儿出生缺陷。MicroRNAs是真核生物中一类长度约为20~24个核苷酸的非编码小分子RNA,通过多种方式调节靶基因的表达而在个体发育和生理病理过程中发挥重要作用,尽管一些microRNAs在骨骼系统被鉴定,并且其中一些microRNAs的功能也在体外培养的体系中被阐明,但在整体动物水平上,它们在软骨形成过程中的功能还所知甚少。  mir92a是mir-17-92族的一员。在本研究中,通过对mir92a时空达图谱的研究,发现mir92a在斑马鱼神经嵴来源的软骨前体细胞中表达。采用吗啉环标记的反义寡核苷酸morpholino抑制斑马鱼胚胎中mir92a的活性时,发现斑马鱼咽部软骨大部分缺失,并且脑颅骨有部分缺失。  颅面骨是由头部神经嵴细胞发育分化而成,涉及神经嵴细胞的命运决定、迁移和分化等重要过程,其中任何环节的异常都会导致颅面畸形。我们发现mir92对斑马鱼软骨发育的影响主要发生在较晚的时期,敲低其表达对神经嵴细胞的特化、迁移和聚集均可无明显影响。但是,软骨前体细胞的增殖和分化却不能正常进行,导致晚期胚胎的软骨前体细胞发生严重凋亡。  本研究发现Bmp拮抗基因noggin3(nog3)是mir92a的一个直接靶基因,其靶向位点位于nog3 mRNA编码区,并且nog3表达在胚胎的软骨前体细胞。敲低mir92,nog3的mRNA稳定性增高,致使Bmp信号不足,导致软骨前体细胞不能正常增殖、分化,引起严重的咽软骨缺失。相反,过表达mir92a,可促进nog3的mRNA的降解,使得Bmp信号在咽软骨区域活性过高,触发细胞凋亡。  综上所述,本研究证明在斑马鱼咽表达的mir92a,在斑马鱼的咽软骨发育过程中是必需的,并且主要通过维持骨形成蛋白BMP的信号强度而保障咽软骨的正常发育。  
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