【摘 要】
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目的:通过观察正常胆汁(NB)、成石性胆汁(CB)、胆管癌性胆汁(TB)对肝门部胆管癌细胞增殖的影响,探讨胆道结石、胆管癌性胆汁与肝门部胆管癌发生、发展的关系。 方法:选择
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目的:通过观察正常胆汁(NB)、成石性胆汁(CB)、胆管癌性胆汁(TB)对肝门部胆管癌细胞增殖的影响,探讨胆道结石、胆管癌性胆汁与肝门部胆管癌发生、发展的关系。 方法:选择我们建立并已稳定传代的肝门部胆管癌细胞系(FRH-0201)。将临床采集的胆汁标本离心(800r/min),双层滤膜(0.22um)除菌;分别作胆汁标本浓度梯度稀释及细胞毒性实验,取得标本终浓度以消除各组胆汁对细胞的毒性作用,分为4组(正常胆汁组NB、成石性胆汁组CB、胆管癌性胆汁组TB及空白对照组);经过噻唑蓝(MTT)比色实验分别检测不同组胆汁在终浓度对该细胞生长的影响以及比较同组内同种胆汁不同胆汁浓度对细胞生长的影响;观察各组胆汁作用后细胞生长曲线,计算细胞倍增时间;应用流式技术检测细胞周期、测定增殖指数(PI=(S+G2/M)%×100),G0/G1期细胞比例及S期细胞比例;观察细胞克隆形成以及光镜及透射电镜观察细胞形态、内部结构等来检测不同组胆汁作用后细胞活性、增殖能力。 结果:当标本终浓度为1%(10ul胆汁标本/ml培养基)时所有胆汁对胆管癌细胞FRH-0201无明显毒性作用。加入1%成石性胆汁(CB)及1%胆管癌性胆汁(TB)后细胞生长明显加快,而正常胆汁(NB)则无明显促进作用;对照组、NB组、CB组和TB组细胞的对数生长期细胞倍增时间分别为24.1 h、24.0h、17.9h、17.9h,CB、TB组对数期细胞倍增时间缩短:MTT实验证明CB组和TB组细胞生长加快,细胞活性增加,CB、TB促进细胞增殖的能力明
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