WE43镁合金的血液相容性、细胞毒性及成骨分化的影响初探

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目的:初步研究WE43镁合金的血液相容性和对骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)的细胞毒性及成骨分化的影响,以期为WE43镁合金作为固定物投入临床使用提供相关实验参考。方法:血液相容性实验分三组:WE43镁合金组、TC4钛合金组、空白对照组,通过体外溶血实验、测定体外凝血时间及使用电镜观察血小板黏附情况,评价WE43镁合金的血液相容性;细胞实验采用全骨髓贴壁法培养SD大鼠BMSCs,镜下观察、记录原代及传代BMSCs形态结构;流式细胞术检测细胞表面标记物;分组:WE43镁合金组、TC4钛合金组、空白对照组,分别使用各组浸提液培养BMSCs,CCK-8法检测WE43镁合金对BMSCs的细胞毒性;茜素红染色、q-PCR检测WE43镁合金诱导BMSCs成骨分化能力。结果:1.体外溶血实验结果显示WE43镁合金和TC4钛合金均不溶血,体外凝血时间实验显示WE43镁合金和TC4钛合金具有良好的抗凝效果,凝血时间与对照组比较无明显差异,表明WE43镁合金和TC4钛合金不会激活凝血系统,电镜观察血小板黏附形态显示WE43镁合金和TC4钛合金不会激活血小板,具有抗凝血能力;2.流式细胞术结果显示:分离培养的P3-P4代细胞高表达非造血细胞系表面抗原CD29(99.3%),CD90(99.87%),低表达造血干细胞表面抗原CD45(1.93%),与所报道BMSCs表型相符;3.CCK-8细胞增殖实验结果显示WE43镁合金组、TC4钛合金组及空白对照组三组细胞随时间增长均呈上升趋势,WE43镁合金组细胞增殖率高于TC4钛合金组及空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);4.与WE43镁合金浸提液接触后BMSCs仍具备干细胞特征,仍能向成骨细胞分化,茜素红染色、PCR检测成骨相关因子:Col1、OCN含量检测验证BMSCs成骨分化高于与TC4钛合金组及阴性对照组,且差异具有统计学意义。结论:WE43镁合金具有较好的血液相容性,对BMSCs无毒性作用,且可促进细胞增殖和成骨分化能力,作为植入物投入临床使用有一定潜能。
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