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第一部分 正常人耳软骨和先天性小耳畸形病人的残耳软骨的组织学及生物化学研究 [摘要] 目的:探讨正常耳软骨与先天性小耳畸形病人的残耳软骨的组织学结构和生化成份的异同。方法:选取年龄在10岁左右,Tanzer分类ⅡA型的20个先天性小耳畸形病人的残耳软骨(A组)。同时取7名同年龄尸体的14侧正常耳廓耳甲部分的软骨(B组)。各做组织学切片20张,HE染色、弹性纤维染色观察。A、B组各取7份标本生化检查胶原、糖胺多糖(GAG)含量;硫酸软骨素(Chs)、硫酸角质素(KS)和透明质酸(HA)占GAG的百分含量。结果:残耳软骨的20个切片中,有3个可见到血管,与血管相邻区域的软骨细胞无嗜碱性的紫蓝色基质。而正常耳软骨的20个切片未见有血管在其中(p<0.05)。细胞增生较活跃。生化检查:A组与B组之间胶原含量无显著性差异;GAG含量有显著性差异,A组(49.00±25.60μg/mg)比B组(28.25±4.80μg/mg)多。在GAG中的组成部分中,A组(HA 38.96±4.97%、Chs 29.02±4.12%、KS 32.16±7.41%)与B组(HA 32.94±3.24%、Chs 33.10±2.61%、KS 33.96±1.66%)之间HA和Chs相对含量有显著性差异,而KS相对含量无显著性差异。结论:10岁左右人的正常耳软骨比同龄的先天性小耳畸形病人的残耳软骨软骨内血管密度要小。残耳软骨与正常耳软骨胶原含量无差异:前者比后者含GAG多。在GAG中的各成分的百分含量中,残耳软骨含HA较高,Chs较低,KS无差异。 第二部分 人残耳软骨细胞体外培养的生物学特性 [摘要] 目的:了解残耳软骨细胞体外培养的生物学特性,为耳软骨组织工程寻找较为合适的种子细胞。方法:将先天性小耳畸形病人的残耳软骨组织与肋软骨组织用胶原酶消化。体外原代和传代培养相比较,研究它们的细胞存活率、在玻璃瓶上的贴壁率、细胞周期、生长曲线和形态学等。结果:1、残耳软骨与肋软骨细胞按常规方法消化后细胞存活率较高(分别为95±3.2%和89±5.5%)。2、残耳软骨与肋软骨细胞原代、第4代、第6代在玻璃培养瓶上的贴壁率有显著差异。传代细胞的贴壁率明显高于原代细