论文部分内容阅读
本文通过单因素试验和正交试验研究了从灰树花中提取多糖的工艺条件。选择提取时间、提取温度、料液比和醇沉浓度作为考察因素，以多糖得率为考察指标，经单因素试验和正交试验，得到最佳提取工艺条件为：以水为提取溶剂，料液比120（W:V），提取温度120℃，提取3h，提取液醇沉时的醇浓度为90％。在最佳提取工艺条件下，灰树花粗多糖得率为67.05％。采用单因素试验和响应面试验研究了Sevage法除去粗多糖中蛋白杂质的最佳纯化工艺条件。共设置了4个单因素条件：选择Sevage试剂中氯仿与正丁醇体积比、多糖溶液与Sevage试剂体积比、振摇时间和脱蛋白次数作为考察因素，以蛋白含量为考察指标，经单因素试验和响应面试验以及验证试验得到除去粗多糖中蛋白杂质的最佳工艺条件为：氯仿与正丁醇体积比为4.02:1、多糖溶液与Sevage试剂体积比为3.07:1、振摇时间为25.6min、脱蛋白次数为1次。在最佳去蛋白条件下脱蛋白率达37.95％，多糖含量达78.32％。在进一步纯化试验中，经筛选采用DEAE-琼脂糖凝胶FF，它具有耐压、耐酸碱和流速快等特点，在本实验中经DEAE-琼脂糖凝胶FF分离后产物中多糖含量达到89.33％。运用Toyopearl HW-75分子筛进一步分离并由高效液相色谱法验证得到单一对称峰，多糖纯度达97.9％。并采用红外光谱、气相色谱、核磁共振法对其进行结构确证。利用高脂高糖饲料和腹腔注射链脲佐菌素诱导得到2型糖尿病小鼠模型，研究了灰树花多糖降血糖和血脂作用。实验结果表明，连续给药8周，模型组小鼠血糖、血脂水平明显升高，灰树花多糖高低剂量组（300mg/kg、100mg/kg）均有降低小鼠血糖、血脂的作用，并呈现剂量依赖性。