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目的:苗药冷骨消痛液原剂型为熏蒸剂，携带使用等受限，本课题将其研发为凝胶贴膏，并按照国家中药新药开发技术要求，以苗药冷骨消痛凝胶贴膏的研制、药效学及毒理学方面进行了初步研究，为进一步新药的研究开发奠定了基础。
方法:
1、提取工艺研究:在原水煎煮方法的基础上，进一步采用星点设计-效应面法优化复方苗药冷骨消痛的乙醇提取工艺，以乙醇体积分数、时间、液料比、与提取次数为自变量，以干浸膏得率和艾纳香素收率的综合评分值为因变量，对自变量各水平进行二次多项式拟合回归，采用效应面法优化最佳的提取工艺条件。
2、成型工艺研究:采用单因素考察法和L18(37)正交设计实验方法初步确定凝胶贴膏基质处方辅料的用量，以NP-700、微粉硅胶、氧化锌、甘油、酒石酸、甘羟铝为自变量，以外观性、舒适性、涂展性、揭帖、皮肤追随性的多指标加权评分值为因变量，对自变量各水平进行方差分析，初步优选各辅料的用量。进一步采用星点设计.效应面法优化辅料的最佳用量，以NP-700、甘油、微粉硅胶、氧化锌、酒石酸为自变量，同样以多指标加权评分值为因变量，对自变量各水平进行二次多项式拟合回归，采用效应面法优化最佳的辅料用量，同时进行加样量的考察。
3、促渗剂的筛选:建立苗药冷骨消痛凝胶贴膏的化学促渗剂，以冰片、薄荷脑和氮酮为化学促渗剂，利用HPLC法进行体外透皮试验，建立凝胶贴膏的化学促渗剂体系;
4、质量标准研究:建立苗药冷骨消痛凝胶贴膏的质量控制方法，根据《中国药典》2015年版通则薄层色谱法对透骨香、艾纳香、五香血藤及苗药冷骨消痛凝胶贴膏剂进行薄层色谱鉴别;根据《中国药典》2015年版通则方法，测定样品的含膏量、赋型性、粘附性;采用高效液相色谱法测定方中君药艾纳香的主要药效成分艾纳香素的含量。
5、药效学研究:采用木瓜蛋白酶复制家兔膝骨性关节炎模型，采用ELISA检测家兔血浆炎症介质IL-1、IL-4、TGF-β、TIMP-1、TNF-α的浓度变化情况，探讨苗药冷骨消痛凝胶贴膏对膝骨性关节炎防治的作用机制。
6、毒理学初步研究:观察苗药冷骨消痛凝胶贴膏的皮肤刺激性，考察其皮肤外给药的安全性，采用单次和多次外给药的方式，在家兔完整皮肤区域分别贴凝胶贴膏和空白基质，观察用药部位的红斑和水肿情况，进行完整皮肤刺激实验评分及强度评价。
结果:
1、苗药冷骨消痛凝胶贴膏的最佳提取工艺条件在原水煎方法(料液比10mL/g、煎煮3次、每次1h)的基础上，进一步采用乙醇加热回流提取:乙醇浓度70％、料液比14mL/g、提取3次、每次0.5h。
2、苗药冷骨消痛凝胶贴膏的空白基质配方为NP-700、微粉硅胶、氧化锌、酒石酸、甘羟铝、丙二醇、甘油，聚乙烯吡咯烷酮，其比例为1.oo:O.05:O.05-0.05:0.20:5.00:5.00:1.Oo，同时确定10％的载药量。
3、苗药冷骨消痛凝胶贴膏的化学促渗剂为2％Azone与2％冰片联合组成二元化学促渗剂。
4、确立了苗药冷骨消痛凝胶贴膏中透骨香、艾纳香和五香血藤的薄层色谱鉴别方法;三批样品含膏量为(11.11±O.55)g/100cm2;赋形性良好，均无任何流满现象;粘附性较好，均能粘住5号钢球;建立了艾纳香素的含量测定方法，其方法学符合《中国药典》要求。
5、苗药冷骨消痛凝胶贴膏可有效防治膝骨性关节炎，其机制可能与抑制血浆炎症介质IL-1、TIMP-1、TNF-α的表达和促进IL-4、TGF.B的表达相关。
6、苗药冷骨消痛凝胶贴膏对家兔皮肤无刺激性，是一种安全性较高的外用制剂。
结论:
通过研究确定了苗药冷骨消痛凝胶贴膏的最佳制备工艺，工艺合理可行，可为其他中药外用制剂的改剂型提供实验参考;诠释苗医药的防治膝骨性关节炎的科学内涵，有助于苗医药的科学发展;为苗药冷骨消痛凝胶贴膏的新药研发奠定了基础，提供了实验依据。
方法:
1、提取工艺研究:在原水煎煮方法的基础上，进一步采用星点设计-效应面法优化复方苗药冷骨消痛的乙醇提取工艺，以乙醇体积分数、时间、液料比、与提取次数为自变量，以干浸膏得率和艾纳香素收率的综合评分值为因变量，对自变量各水平进行二次多项式拟合回归，采用效应面法优化最佳的提取工艺条件。
2、成型工艺研究:采用单因素考察法和L18(37)正交设计实验方法初步确定凝胶贴膏基质处方辅料的用量，以NP-700、微粉硅胶、氧化锌、甘油、酒石酸、甘羟铝为自变量，以外观性、舒适性、涂展性、揭帖、皮肤追随性的多指标加权评分值为因变量，对自变量各水平进行方差分析，初步优选各辅料的用量。进一步采用星点设计.效应面法优化辅料的最佳用量，以NP-700、甘油、微粉硅胶、氧化锌、酒石酸为自变量，同样以多指标加权评分值为因变量，对自变量各水平进行二次多项式拟合回归，采用效应面法优化最佳的辅料用量，同时进行加样量的考察。
3、促渗剂的筛选:建立苗药冷骨消痛凝胶贴膏的化学促渗剂，以冰片、薄荷脑和氮酮为化学促渗剂，利用HPLC法进行体外透皮试验，建立凝胶贴膏的化学促渗剂体系;
4、质量标准研究:建立苗药冷骨消痛凝胶贴膏的质量控制方法，根据《中国药典》2015年版通则薄层色谱法对透骨香、艾纳香、五香血藤及苗药冷骨消痛凝胶贴膏剂进行薄层色谱鉴别;根据《中国药典》2015年版通则方法，测定样品的含膏量、赋型性、粘附性;采用高效液相色谱法测定方中君药艾纳香的主要药效成分艾纳香素的含量。
5、药效学研究:采用木瓜蛋白酶复制家兔膝骨性关节炎模型，采用ELISA检测家兔血浆炎症介质IL-1、IL-4、TGF-β、TIMP-1、TNF-α的浓度变化情况，探讨苗药冷骨消痛凝胶贴膏对膝骨性关节炎防治的作用机制。
6、毒理学初步研究:观察苗药冷骨消痛凝胶贴膏的皮肤刺激性，考察其皮肤外给药的安全性，采用单次和多次外给药的方式，在家兔完整皮肤区域分别贴凝胶贴膏和空白基质，观察用药部位的红斑和水肿情况，进行完整皮肤刺激实验评分及强度评价。
结果:
1、苗药冷骨消痛凝胶贴膏的最佳提取工艺条件在原水煎方法(料液比10mL/g、煎煮3次、每次1h)的基础上，进一步采用乙醇加热回流提取:乙醇浓度70％、料液比14mL/g、提取3次、每次0.5h。
2、苗药冷骨消痛凝胶贴膏的空白基质配方为NP-700、微粉硅胶、氧化锌、酒石酸、甘羟铝、丙二醇、甘油，聚乙烯吡咯烷酮，其比例为1.oo:O.05:O.05-0.05:0.20:5.00:5.00:1.Oo，同时确定10％的载药量。
3、苗药冷骨消痛凝胶贴膏的化学促渗剂为2％Azone与2％冰片联合组成二元化学促渗剂。
4、确立了苗药冷骨消痛凝胶贴膏中透骨香、艾纳香和五香血藤的薄层色谱鉴别方法;三批样品含膏量为(11.11±O.55)g/100cm2;赋形性良好，均无任何流满现象;粘附性较好，均能粘住5号钢球;建立了艾纳香素的含量测定方法，其方法学符合《中国药典》要求。
5、苗药冷骨消痛凝胶贴膏可有效防治膝骨性关节炎，其机制可能与抑制血浆炎症介质IL-1、TIMP-1、TNF-α的表达和促进IL-4、TGF.B的表达相关。
6、苗药冷骨消痛凝胶贴膏对家兔皮肤无刺激性，是一种安全性较高的外用制剂。
结论:
通过研究确定了苗药冷骨消痛凝胶贴膏的最佳制备工艺，工艺合理可行，可为其他中药外用制剂的改剂型提供实验参考;诠释苗医药的防治膝骨性关节炎的科学内涵，有助于苗医药的科学发展;为苗药冷骨消痛凝胶贴膏的新药研发奠定了基础，提供了实验依据。