肺癌组织三维结构体视学定量及其胞内微囊观察与分析

来源 :第一军医大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:w354026268
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目的 一.用体视学方法系统定量揭示肺癌细胞及其超微结构的三维形态结构特点和变化规律,并探讨肺癌细胞核的有关体视学参数在肺癌诊断分型与分级方面的意义及肺癌细胞超微结构变化的意义;二.观察、测试及分析肺腺癌细胞内微囊的形态特点,并探讨其形成与演变过程及其形成机制。 方法 收集78例外科手术切除的肺癌标本及正常肺组织,分为肺鳞癌组(a)、肺腺癌组(b)、肺腺鳞癌组(c)、肺小细胞癌组(d)、肺大细胞癌组(e)及正常组(f);肺鳞癌组又分为高分化组(a1)、中分化组(a2)及低分化组(a3);肺腺癌组又分为高分化组(b1)、中分化组(b2)、低分化组(b3)及细支气管肺泡癌组(b4)。每例随机切3个蜡块,HE染色,每张切片随机取3—4个视野,用Image—Pro图像分析软件测试胞核及癌巢,按体视学公式计算以癌巢为参照空间时肺癌细胞核的体积密度(Vvn)、表面积密度(Svn)、数密度(Nvn)、平均体积(vn)、平均表面积(sn)、表面积与体积比(Rsvn)、平均自由程(λn)及核浆比(Rnp),此外还有以胞核为参照空间时核仁的数密度(Nvnu)。对以上各组测试的体视学参数值行单因素方差分析和组间两两比较;对不同分化程度的肺鳞癌组间差异有显著性的参数与肺鳞癌分化程度做相关分析;对不同类型的肺癌及正常组,对不同分化程度的肺鳞癌和肺腺癌及正常组,对肺的低分化癌(包括低分化鳞癌、低分化腺癌、小细胞癌及大细胞癌)分别行判别分析和逐步判别分析。 收集24例外科手术切除和纤支镜活检新鲜肺癌标本及正常肺组织,分为肺鳞癌组、肺腺癌组和正常组。常规电镜制样、半薄切片定位后行超薄切片;按体视学原理和方法在电镜下随机摄片,用Image-Pro图像分析软件设计方网测试系统进行测试。细胞核以细胞为参照空间,线粒体和溶酶体以胞浆为参照空间,核仁以细胞核为参照空间,按体视学公式分别计算它们的下列参数:体积密度(Vv)、表面积密度(sv)、数密度(Nv)、平均体积(v)、平均表面积(s)、平均自由程(劝、表面积与体积比(Rsv)及核浆比(助p);比较这些参数在不同组间的差异。此外,对肺腺癌细胞内微囊进行观察与分析。结果一肺癌细胞核有关体视学参数基本测试结果 肺小细胞癌细胞核的VVll、Svn、琢11、NVn、vn、s。及林7项参数与肺鳞癌、肺腺癌、肺腺鳞癌及肺大细胞癌组间差异均有显著性;在肺鳞癌、肺腺癌、肺腺鳞癌和肺大细胞癌4组非小细胞肺癌中,肺鳞癌细胞核的vv。和Rsv。与肺腺鳞癌组间差异均有显著性,肺鳞癌细胞核的Vv。与肺大细胞癌组间差异亦有显著性,肺腺癌细胞核的Vv。和助p与肺腺鳞癌组间差异均有显著性。上述4组非小细胞肺癌细胞核的Svll、RSVn、NVn、vn、S。及称组间差异均无显著性。 此外,肺鳞癌细胞核的vvn、svn、Rsvn、Nvn、vn、sn、Rllp、称及Vvn。9项参数的变异系数分别为:0.3033、0.4269、0.1693、0.6040、0.3891、0·2478、0.4947、0.5 175、1.2863;肺腺癌细胞核上述参数的变异系数分别为:0.2130、0.2146、0.1159、0.3531、0.3173、0.2069、0.2955、0.3523、0.8447;肺腺鳞癌细胞核上述参数的变异系数分别为:0.2432、0.2947、0.1327、0.6557、0.3455、0.2413、0.3077、0,3917、0.7791;肺小细胞癌细胞核上述参数的变异系数分别为:0.0766、0.1554、0.0844、0.3469、0.2409、0.1704、0.5512、0.5044、一;肺大细胞癌细胞核上述参数的变异系数分别为:0.2392、0.2188、0 .1 0 10、0.2709、0.2710、0.1761、0.3359、0.2723、0.9738。 二.肺癌、肺癌亚型及正常组有关体视学参数测试分析结果 肺小细胞癌细胞核的Vvn、svn、Rsvn、 、助p及肠6项参数与正常组组间差异均有显著性,v。和s。与正常组组间差异均无显著性;肺鳞癌、肺腺癌、肺腺鳞癌及肺大细胞癌4组非小细胞肺癌细胞核的Vvn、Nvn、vn、sn及Rsv。5项参数与正常组组间差异均有显著性,肺鳞癌和肺腺癌细胞核的助p与正常组组间差异均有显著性,上述4组非小细胞肺癌细胞核的sv。及林与正常组组间差异均无显著性。由Vvn、Svn、Nvn、vn、sn、肠、Rsvn及助p8项参数所建立的肺癌组与正常组的判别函数(1),对70例肺癌及8例正常肺组织判别均正确;由Vvn、svn、Rsvn、vn、s。及林六项参数所建立的不同类型肺癌及正常组的判别函数(2)和由Vvn、Svn、sn及肠四项参数所建立的不同类型肺癌的判别函数(3),对肺鳞癌和肺腺癌判别的准确度均为90%,判别6例肺小细胞癌均正确。三.不同分化程度的肺鳞癌和肺腺癌及正常组细胞核有关体视学参数测试分析结果 1.肺鳞癌细胞核的Nvn、Rsvn及vn3项参数在不同分化程度的肺鳞癌组间差异均有显著性;且Rsv。和Nv。与肺鳞癌的分化程度呈负相关,v。与肺鳞癌的分化程度呈正相关; 2.由vvn、svn、Nvn、Rsv。、助p、肠、vn、sn及Nvnug项参数建立的判别函数(4)和由Rsvn和称建立的判别函数(5)判别肺的高分化、中分化、低分化鳞癌及正常组的准确度分别为83.3%、87.5%、83.3%、100%和83.3%、75.0%、83.3%、100%;由Vvn、Svn、NVfi、Rsv。、助p、vn、sn及Nvn。8项参数建立的判别函数(6)和由Rsv。和称建立的判别
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