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目的:缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是由于宫内窘迫、新生儿窒息等引起的新生儿脑部严重损伤,有较高的发病率和死亡率,也是导致智能落后和脑性瘫痪等儿童伤残的主要原因。HIBD发病机制复杂,涉及多个环节,而凋亡是后期神经细胞缺失和功能障碍的主要原因。细胞凋亡持续时间较长,适当的治疗可逆转凋亡的病理过程而改善预后。本实验应用新生大鼠HIBD模型,以神经生长因子(NGF)、神经节甘脂(GM1)及NGF+GM1联合应用进行治疗,观察它们对HIBD海马神经细胞的近期保护作用及远期学习记忆能力的影响,以探讨HIBD更为有效的治疗途径和方法,为临床治疗新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy HIE)提供理论依据。 方法:7日龄(postnatal day 7,p7)SD大鼠,参照Rice法制作新生鼠HIBD模型。随机分为假手术组、HIBD组、NGF组、GM1组和NGF+GMI合用治疗组。HIBD组、NGF组、GM1组及合用组以腹腔注射法分别给药,每目1次,连用7d。NGF组予浓度为200u/ml的NGF10ml/kg+生理盐10ml/kg;GM1组予浓度为2mg/ml的GM110ml/kg+生理盐水10ml/kg:NGF+GM1组予浓度为200u/ml的NGF10ml/kg+浓度为2mg/ml的GM110ml/kg;HIBD组只予等量的生理盐水。各组均于缺氧缺血(HI)后6h、24h、72h、7d灌注,取脑,切片,HE染色观察海马区神经细胞形态变化;免疫组化染色检测海马区神经细胞bcl-2、Bax蛋白表达;Tunel法检测海马区细胞凋亡情况;日龄42d时以Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力。并将上述各组指标进行统计学分析比较,作出结论。 结果: 1.HE染色海马区形态学变化 HE染色光镜下观察可见假手术组双侧及HIBD组右侧大脑海马结构层次清楚,神经元细胞排列整齐、形态正常。HIBD组左脑海马区于HI后6h出现细胞肿胀、细胞排列紊乱,24h出现细胞变性、坏死;72h时变性、坏死更趋明显,HI后7d海马区细胞呈现片状坏死软化。NGF组、GM1组及合用组在各时间点左侧海马病理改变较HIBD