营养水平对初产母猪妊娠早期胚胎存活和Leptin分泌及基因表达的影响

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:herozds2009
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本研究以初产母猪为试验动物,研究营养水平对妊娠早期胚胎存活和瘦素(Leptin)分泌量及基因mRNA表达量的影响。试验选取日龄和体重(113.40±9.58kg)相近的长白×大白杂交初产母猪63头,配种后随机分到三个营养水平组(高、中、低水平)中,各营养水平组母猪每天的饲喂量分别为2.0倍、1.2倍和0.6倍的维持需要,每个营养水平组3个重复,每个重复7头猪。分别在母猪妊娠12天、25天和35天称重、取血和屠宰取样。然后通过酶联免疫法(ELISA)测定母猪血清及子宫冲洗液中的Leptin浓度,同时使用实时荧光定量反转录多聚酶链式反应(Real Time-quantitative RT-PCR)的方法研究胚胎中Leptin、瘦素受体(obR)、信号传导与转录活化因子-3(STAT3)以及DNA甲基转移酶-1(DNMT1)基因mRNA的表达量。试验结果如下:1、营养水平显著影响初产母猪妊娠早期的胚胎存活率。在母猪的各妊娠阶段(妊娠12天、25天和35天),中营养水平组的胚胎存活率显著高于高营养水平组和低营养水平组(P<0.05),而高营养水平组和低营养水平组之间的胚胎存活率差异不显著(P>0.05)。2、营养水平显著影响初产母猪妊娠早期Leptin的分泌量。母猪妊娠第12天时,高营养水平组血清和子宫冲洗液中Leptin浓度显著高于中营养水平组(P<0.05),极显著高于低营养水平组(P<0.01)。母猪妊娠25和35天时,高营养水平组血清和子宫冲洗液中Leptin浓度极显著高于中、低营养水平组(P<0.01);中营养水平组血清中Leptin浓度极显著高于低营养水平组(P<0.01);中营养水平组子宫冲洗液中Leptin浓度与低营养水平组之间差异不显著(P>0.05)。母猪妊娠12、25和35天时,血清和子宫冲洗液中Leptin浓度与母猪采食量呈极显著的线性增加(P<0.01);妊娠25天、35天血清中Leptin浓度与母猪屠宰体重呈极显著的线性增加(P<0.01)。妊娠期初产母猪Leptin的分泌量不断增加。同一营养水平下,随着妊娠时间的延长,母猪血清中Leptin的浓度呈逐渐增加的趋势(P<0.05)。3、营养水平影响早期胚胎中Leptin、obR、STAT3和DNMT1基因mRNA的表达量。在母猪妊娠各阶段(妊娠12天、25天和35天),不同营养水平组胚胎中各基因的表达(相对于H2A)结果如下:母猪妊娠12天时,高营养水平组Leptin基因mRNA的表达量极显著高于中、低营养水平组(P<0.01),而中、低营养水平组间差异不显著(P>0.05);高营养水平组obR基因mRNA的表达量极显著高于低营养水平组(P<0.01),DNMT1基因mRNA的表达量显著高于低营养水平组(P<0.05),而中水平组与高、低营养水平组差异都不显著(P>0.05);高营养水平组STAT3基因mRNA的表达量极显著高于中、低营养水平组(P<0.01),中水平组显著高于低营养水平组(P<0.05)。母猪妊娠25天时,高营养水平组Leptin基因mRNA的表达量极显著高于中、低营养水平组(P<0.01),obR基因mRNA的表达量显著高于中、低营养水平组(P<0.05),而后两者差异不显著(P>0.05);高、中营养水平组STAT3基因mRNA的表达量差异不显著(P>0.05),高营养水平组极显著高于低营养水平组(P<0.01),而中营养水平组显著高于低营养水平组(P<0.05);高、中营养水平组DNMT1基因mRNA的表达量极显著高于低营养水平组(P<0.01),同时高营养水平组显著高于中营养水平组(P<0.05)。母猪妊娠35天时,高营养水平组Leptin和DNMT1基因mRNA的表达量显著高于中营养水平组(P<0.05),Leptin基因mRNA的表达量极显著高于低营养水平组(P<0.01),而DNMT1基因mRNA的表达量中、低营养水平组差异不显著(P>0.05);高营养水平组obR基因mRNA的表达量显著高于低营养水平组(P<0.05),而中水平组与高、低营养水平组差异都不显著(P>0.05);高、中营养水平组STAT3基因mRNA的表达量极显著高于低营养水平组(P<0.01),而前两者差异不显著(P>0.05)。结论:1、营养水平显著影响初产母猪妊娠早期的胚胎存活率。在妊娠35天前给母猪饲喂1.2倍维持需要的饲粮能获得较高的胚胎存活率。而高营养水平饲喂和严重限饲都会导致早期胚胎存活率降低。2、营养水平显著影响初产母猪妊娠早期血清和子宫冲洗液中Leptin的分泌量。母猪血清和子宫冲洗液中Leptin的浓度均随营养水平的增加而升高,且与母猪采食量和屠宰体重正相关。同一营养水平下,随着妊娠时间的延长母猪血清中Leptin的浓度逐渐升高。过高过低的Leptin分泌对胚胎的发育不利。3、母猪妊娠早期的营养水平显著影响早期胚胎中Leptin、obR、STAT3和DNMT1基因mRNA的表达。高营养水平(2倍维持需要)上调这些基因在胚胎中的表达量,低营养水平(0.6倍维持需要)下调这些基因在胚胎中的表达量。严重限饲引起胚胎中Leptin、obR、STAT3和DNMT1基因的下调,从而对胚胎存活造成不利影响。
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