【摘 要】
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本论文以黑曲霉TG-Y为实验菌株,通过太空诱变,选育出优良突变株TG-Y-1和TG-Y-2,产木聚糖酶能力分别提高20.22%和21.76%。利用50L发酵罐研究木聚糖酶液体发酵工艺,优化基础培
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本论文以黑曲霉TG-Y为实验菌株,通过太空诱变,选育出优良突变株TG-Y-1和TG-Y-2,产木聚糖酶能力分别提高20.22%和21.76%。利用50L发酵罐研究木聚糖酶液体发酵工艺,优化基础培养基配方,提高碳源中玉米芯用量,选定玉米浆做为有机氮源,优化后的基础培养基配方为:玉米芯 60g/L,玉米浆 20g/L,(NH4)2S045g/L,KH2P043g/L,MgS04lg/L,聚乙二醇 2000 0.5g/L。酸水解B淀粉浆,替代葡萄糖和玉米芯做为补料培养基的碳源和诱导物,解决了玉米芯易堵塞管道的问题,优化后的补料培养基配方为:B淀粉浆酸解液(以葡萄糖含量计)50g/L,玉米浆 30g/L,(NH4)2S0415g/L,KH2P04 10g/L,MgS045g/L,碳酸钙 0.75g/L。研究温度、pH、转速、通风量、溶氧、补料速率、种龄、接种量、装料系数对发酵过程的影响,开发出分阶段调控策略并成功放大到130m3发酵罐,酶活力稳定在2500U/ml以上。研究木聚糖酶后提取工艺,包括压滤和膜浓缩两道工序,收率为81.03%。酶学特性研究表明,该酶的最适反应温度为50℃,最适作用pH为5.0,温度和pH对酶的稳定性影响显著。对酶液进行防腐处理,最优防腐剂组合为:60g/L氯化钠、3g/L苯甲酸钠、2g/L山梨酸钾、40g/L山梨醇。经此处理,90天残留酶活力可达91.78%,能够满足工业生产要求。
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