【摘 要】
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目的:研究大鼠角膜新生血管的差异基因表达谱,并用原位杂交和western blot方法对差异表达基因MMP-13的mRNA和蛋白质水平表达进行进一步证实。 方法:1.对38只SD大鼠进行双
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目的:研究大鼠角膜新生血管的差异基因表达谱,并用原位杂交和western blot方法对差异表达基因MMP-13的mRNA和蛋白质水平表达进行进一步证实。 方法:1.对38只SD大鼠进行双眼角膜缝线,创建CNV动物模型。缝线后1d、4d、7d、12d、24d和90d进行光镜观察及角膜铺片CNV定量检查。2.40只SD大鼠实验眼角膜缝线后4d和12d处死。用有5705条基因的Oligo芯片检测角膜组织的基因表达谱,并对差异表达基因进行分析。3.30只SD大鼠行实验眼角膜缝线后1d、4d、12d、24d、90d处死,用原位杂交方法检测MMP-13mRNA的表达。4.18只SD大鼠双眼角膜缝线后1d、4d、7d、12d和24d处死,用western blot方法检测MMP-13的蛋白质表达。 结果:1.裂隙灯显微镜观察:缝线后1d出现角膜水肿,角膜缘血管网扩张;4d出现新生血管芽;12d新生血管密度及管径达到高峰值;24d新生血管退行。角膜铺片CNV定量:缝线后1～12d,CNV面积逐渐增大,12d时达高峰值(8.70±0.76)mm~2。2.缝线后4d,5705条基因中,差异表达基因为57条,其中上调29条,下调28条(ratio>4或<0.25)。上调明显的基因有SCYA2、S100A9、
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