【摘 要】
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研究目的: 1.基础部分:研究和探讨膀胱癌细胞与DC融合冲击致敏DC获得DC疫苗后,是否在体外诱导针对异株膀胱癌细胞的CTL反应、在动物实验中产生对异株膀胱癌动物模型的特异
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研究目的: 1.基础部分:研究和探讨膀胱癌细胞与DC融合冲击致敏DC获得DC疫苗后,是否在体外诱导针对异株膀胱癌细胞的CTL反应、在动物实验中产生对异株膀胱癌动物模型的特异性抗肿瘤免疫效应,从而探讨同一肿瘤的不同细胞株致敏的DC疫苗是否具有交叉免疫性。 2.临床部分:探讨反映肿瘤发生发展不同阶段的尿瘤标CYFRA21-1、端粒酶、VEGF联合检测膀胱移行细胞癌(BTCC)的价值和意义。 研究方法: 1.基础部分:对膀胱癌细胞株5637和T-24传代培养;主要参照Inaba等的方法,结合粘附贴壁原理,进行小鼠骨髓DC细胞的原代培养和在小鼠重组GM-CSF、IL-4刺激下、在RPMI-1640完全培养液内的DC体外扩增;应用DC表面特异性细胞分子标志对DC进行免疫荧光鉴定和流式细胞术鉴定,并通过扫描电镜技术对DC进行表面形态鉴定;利用聚乙二醇PEG细胞融合技术,完成DC与膀胱癌细胞5637的体外细胞融合,构建递呈完全细胞性抗原的DC疫苗;利用尼龙毛柱分离法完成BALB/c小鼠脾脏反应T细胞的分离;通过DC/5637杂交瘤DC疫苗与T细胞的混合培养体外诱导特异性CTL,并以MTT法对CTL的肿瘤细胞杀伤活性进行检测;检测DC/5637杂交瘤DC疫苗诱导的CTL对膀胱癌T-24细胞是
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