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bgl1D基因(Genbank登录号为FJ686869)是本实验室从宏基因组文库中筛选得到的一个编码β-葡萄糖苷酶活性的新基因资源。前期已经构建得到表达β-葡萄糖苷酶活性的重组菌株pGXAG801。该基因的生物信息学分析表明：在氨基酸水平上，Bgl1D基因编码蛋白与已知来自肉毒杆菌脂肪酶蛋白有31％的相似性，由此推测该Bgl1D基因除具有编码β-葡萄糖苷酶活性外，可能还具有编码脂肪酶活性的功能，其编码蛋白可能是一种兼职蛋白质。在核苷酸水平上，Bgl1D与已知数据库中的脂肪酶基因相似性很低。
重组菌株pGXAG801编码目的蛋白纯化后，以PNPB为底物，对其进行了脂肪酶酶学性质的初步研究，得到以下结论：该蛋白的最适pH为9.0;最适温度为25℃;Km为0.54mmol/L;Vmax为3.17μmol/min;最适条件下酶活为8.2U/mg;Al3+、Li+、Cu2+离子对酶反应有激活作用，Fe2+、Fe3+离子有抑制作用。验证了该基因编码蛋白除具有β-葡萄糖苷酶活性外，同时还具备脂肪酶的活性。
利用易错PCR技术，以bgl1D基因为模板构建突变体库，筛选得到一批克隆突变子，进行筛选后得到突变体pGXAG801-1和pGXAG801-2，对该突变酶纯化后验证酶活，发现β-葡萄糖苷酶和脂肪酶活性均降低，其中1号β-葡萄糖苷酶酶活为原始菌株的30％，脂肪酶为20％，测序表明该蛋白氨基酸序列有3个位点发生突变，2号菌株β-葡萄糖苷酶酶活为原始菌株的20％，脂肪酶酶活丧失。测序表明该蛋白氨基酸序列有6个位点氨基酸发生突变，由此分析推测突变处可能为该酶保守区域。
基因bgl1D编码蛋白除具有β-葡萄糖苷酶催化活性外，还有脂肪酶催化功能，推测bgl1D基因有可能是一种新型编码脂肪酶的基因。通过突变体文库构建说明保守氨基酸序列对酶活的重要性，为进一部阐明催化机理打下坚实基础。