【摘 要】
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目的:观察大鼠缺血再灌注后脑组织病理改变、梗死体积比及脑组织内EAAT2(excitatory amino acidstransporter 2)表达变化,明确ENT1(equilibrativenucleosi de transporter 1)
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目的:观察大鼠缺血再灌注后脑组织病理改变、梗死体积比及脑组织内EAAT2(excitatory amino acidstransporter 2)表达变化,明确ENT1(equilibrativenucleosi de transporter 1)抑制剂NBTI(S-4-Nitrobenzyl-6-thioinosine)对EAAT2表达的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组,假手术组,缺血再灌注3小时、6小时、24小时、72小时、1周组及NBTI组。使用大脑中动脉阻塞法建立大鼠脑缺血再灌注模型。TTC(triphenyltetrazolium chloride)染色对脑组织梗死区域进行染色,IPP(image-pro plus)软件计算脑梗死体积比。HE(hematoxylin-eosin)染色观察大鼠脑组织病理学改变。免疫组化及Western Blotting对EAAT2的表达进行定位及定量分析。结果:TTC染色结果显示正常组及假手术组中未见梗死灶,缺血再灌注后各时间点组中均见梗死灶,其梗死体积比差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示,非梗死脑组织结构清晰,细胞核大小规则,未见异常病理性改变。而梗死侧缺血区脑组织大部分神经细胞坏死,细胞核固缩,细胞核形态不规则。Western Blotting结果显示,在正常组及假手术中EAAT2有基础表达,缺血再灌注后3小时,6小时后EAAT2的表达较正常组及假手术组明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。随缺血再灌注时间的延长(24小时,72小时,1周),EAAT2表达逐渐下降。免疫组化结果显示海马CA1、CA3、DG区见EAAT2主要表达在神经细胞包膜上。使用ENT1抑制剂NBTI后显著减轻脑梗死体积比,与对照组比具有显著差异(P<0.01)。Western Blotting结果显示,与再灌注24小时组对比,抑制剂组中EAAT2的表达明显增高,其差异具有统计学意义(P<0.05)结论:使用ENT1抑制剂可减轻脑梗死体积,推测其机制可能是NBTI提高EAAT2的表达。
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