本实验的目的主要是对脱位牙在脱位后用何种溶液(保存介质)保存，以及保存多长时间可以最大限度的保护PDL细胞活性进行研究，同时验证胶原酶和Dispase消化法在该研究领域的可行性。 研究方法：采用因正畸需要而拔除的126颗第一、第二双尖牙为实验对象。要求根尖孔发育已经完成，无龋坏及牙周病变。实验对象随机分为实验组、阳性对照组和阴性对照组。实验组：为放入不同保存介质中的脱位牙，分为4组，第一组保存介质为水(自来水)，第二组为Hanks液，第三组为牛奶，第四组为生理盐水。阳性对照组：为不浸泡在保存介质中的脱位牙，拔牙后立即处理计数。阴性对照组：为干燥状态下保存的脱位牙。以上各组除阳性对照组外，又分为4个不同的时段组，分别为0.5小时组，1小时组，1.5小时组，2小时组。每组6颗牙。将拔除的新鲜牙用镊子夹住牙冠，将牙颈部1/3的牙周膜及牙龈软组织刮除。用生理盐水冲洗后，放入上述各组保存介质中；或立即处理(阳性对照组)；或干燥保存(阴性对照组)。将各组脱位牙放入消毒的试管中，每个试管中加入2.5mL用PBS配制的消化液其中包括0.2mg/mL胶原酶Ⅱ和2.4-mg/mLDispase。消化30分钟。消化结束后，加入10μl胎牛血清。在800转/分下离心5分钟。用消毒的吸管移去上清液，加入0.2毫升PBS，进行细胞计数并调整细胞浓度到1×106/ml。取9滴细胞悬液加入试管，加1滴0.4％台盼蓝。在光学显微镜下观察并计数活细胞和死细胞数量。免疫组化方法检测：将消化好的单细胞混悬液进行甩片，甩好的细胞经丙酮固定，吹干，按常规ABC法操作，进行波丝蛋白、角蛋白染色，光镜下观察胞质染色情况。最后进行统计学处理。 研究结果：(1)在光学显微镜下观察台盼蓝染色后的细胞形态，有活性的牙周膜成纤维细胞无色，呈圆形，胞体丰满，胞浆均匀，核圆形。死亡的牙周膜细胞染为均匀的兰色，胞核消失。(2)免疫组化显示细胞角蛋白染色阴性，细胞胞浆棕黄色着色，波形丝蛋白染色阳性。说明本实验所检测的细胞为PDLC。(3)在同一时间点不同保存介质中有活性的牙周膜细胞数量依次为Hanks液，牛奶，生理盐水，水。Hanks液，牛奶，生理盐水之间及其与阳性对照组比较无显著性差异(p＞0.05)。阳性对照组，Hanks液，牛奶，生理盐水中有活性牙周膜细胞数量，与第一组(水)和阴性对照组比较，都有显著性差异(p＜0.01)。第一组与阴性对照组仅在0.5小时的时间点，无显著性差异(p＞0.05)，其余时间点均有显著性差异(p＜0.01)。(4)Hanks液，牛奶，生理盐水在不同时间点之间无显著性差异(p＞0.05)。在每个时间点，第一组及阴性对照组活性牙周膜细胞数量均有显著性降低(p＜0.01)。阴性对照组0.5小时时间点明显减少但仍有较多的活牙周膜细胞，1小时后活牙周膜细胞迅速减少，在2小时的时候幸存的牙周膜细胞非常少。第一组在几个时间点活性牙周膜细胞也明显减少，但减少的程度要小于干燥状态下的情况，2小时的时间点活性牙周膜细胞比干燥状态下明显多(p＜0.01)。 研究结论：(1)生理盐水，牛奶，Hanks液可以作为脱位牙的保存介质，但Hanks液和生理盐水在大部分场合下不易获得，而牛奶则比较容易获取，因此，牛奶是一种较好且容易获得的值得提倡应用的脱位牙保存介质。(2)在无法获取上述保存介质的情况下，水可作为短暂的保存介质，较长时间时则不宜作为脱位牙的保存介质。(3)胶原酶和Dispase消化法和台盼蓝排除染色技术，比较好的显示出有活性与无活性的PDLC，是一种可行的检测PDLC活性的方法。