犬瘟热发病机理的免疫及分子病理学研究

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脑组织中髓鞘脱失和淋巴组织中淋巴细胞减少是犬瘟热发生的主要原因,但其发生的机理还未完全搞清。本研究主要通过三个相关的实验对之进行了研究。 一是急性犬瘟热原发性脱髓性脑病的免疫组化研究。患急性犬瘟热病犬的中枢神经系统的病理特征是脑白髓的髓鞘脱失和在星状胶质细胞内包涵体形成。为了进一步观察由犬瘟热病毒所致的原发性脑损伤和包涵体形成;进一步研究脑损伤与临床上神经症状的关系,对10只患有急性犬瘟热的自然病例进行了详细的研究。为了详细的观察病损,根据脑组织的解剖部位的相互联系,将脑组织分为三个部分十一个切面,即:大脑(五个切面)、脑干(四个切面)和小脑(两个切面)。从这些切面取材的组织制作切片后用HE、LFB染色和免疫组织化学染色。结果表明:特异性的髓鞘脱失广泛发生于脑组织,大脑的病变较轻,而严重的脱髓主要发生于脑干围绕着脑室的部位;而小脑则在轻度和中等度弥漫性脱髓的基础上散在有严重的多发性的局灶性脱髓。在脑白质脱髓部位形成非常明显的海绵状结构。此处无小胶质细胞出现,也无任何炎性反应。脱髓性病变为非对称性发生,对神经束没有明显的亲和性。在室管膜细胞下方的星状胶质细胞和室管膜细胞的胞浆及细胞核内可检出嗜酸性核内和胞浆内包涵体。用抗犬瘟热核蛋白抗体染色,带有包涵体的室管膜细胞呈强阳性反应。一些锥体细胞、神经核细胞、小脑的浦氏细胞,特别是小锥体细胞发生程度不同的变性,有的神经细胞核发生浓缩。依据试验结果,作者认为由犬瘟热病毒引起的原发性脑损伤是一种脱髓性脑病,而不是脑炎;位于室管膜细胞内的包涵体是在脑组织中诊断犬瘟热的重要证据;犬瘟热病毒引起的脑损伤为一种非特异性、非对称性损伤,而且发生损伤的部位也不固定。因此,病犬的临床症状也是不完全相同的。 二是自发性犬瘟热脱髓性脑病发生机理的研究。迄今为止,虽然对神经元和神经胶质细胞做了大量的研究,但犬瘟热的脑组织脱髓的发生机理还不清楚。为了进一步调查神经纤维的脱髓与脑细胞成份的关系,用12只患犬瘟热的自然病例进行了本实验。脑组织的取材方法与实验一相同。石蜡包埋制成的组织切片经HE染色后用光学显微镜检查。选择无脱髓组织、轻度脱髓、中度脱髓和重度脱髓的组织切片分别进行免疫组织化学染色。结果表明脑组织的血液循环障碍主要包括脑淤血、水肿、血栓形成和弥漫性血管内凝血的发生。脱髓部位的少突胶质细胞发生代谢紊乱和凋亡。用抗犬瘟热病毒抗体染色,星状胶质细胞呈现出强阳性反应;用抗GFAP染色,纤维性星状胶质细胞在急性、轻度和中度脱髓区呈较强阳性反应,在病灶中可检出发生凋亡的星状胶质细胞。一些脑室管膜细胞也被犬瘟热病毒感染,许多细胞内的包涵体和凋亡的细胞也被发现。少数神经细胞变性和皱缩,其核发生浓缩。据此,作者认为脑组织的脱髓变化主要与血液循环障碍和少突胶质细胞的代谢紊乱及凋亡有关;脑组织脱髓的原因是许多病因共作用的结果,而非是一种病因所致。 三是自发性犬瘟热T、B细胞变化的研究。为了调查患犬瘟热病犬的淋巴组织中T、B细胞变化的特点及淋巴细胞减少的发病机制,用12只自然感染犬瘟热的病犬和4只对照犬进行了本实验。实验通过免疫组织化学的方法观察了T细胞(用CD3和CD45RO检测T细胞)、B细胞(用IgG、IgM抗血清检测B细胞)和犬瘟热病毒(抗犬瘟热病毒抗体)在病犬淋巴组织中的分布。结果表明:在淋巴组织中的淋巴细胞、淋巴小结中树突状细胞、淋巴组织的树突细胞和巨噬细胞中均检出了病毒阳性反应细胞。在骨髓组织的前髓细胞中也发现犬瘟热病毒阳性反应和嗜酸性胞浆内和核内包涵体的存在。与对照组相比,CD3和CD45RO
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