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[研究背景]:儿童哮喘是儿童呼吸道的常见病,是有着强烈遗传因素的异质性疾病,目前它的发病机制一直没有得到完整揭示。微小分子RNA(microRNA,miRNA)是一个非蛋白质编码的小分子RNA,参与了不同生物进程,包括细胞增殖、变异和凋亡。以往的研究已经发现miRNA调控了许多疾病免疫反应。我们设想在受基因与环境交互影响的儿童哮喘中,miRNA可能也起着一个重要调控作用。[研究目的]:通过本次研究发现相关的miRNA和其靶基因,以及所关联的信号通路;从而能解释儿童哮喘发病可能的分子机制。[研究方法]:研究分二部分,1)随机收集12个儿童哮喘和12个正常儿童外周血进行了miRNA芯片(miRCURY~TMM LNA Array,v.18.0)筛查研究。筛选出在哮喘组与正常组比较有表达差异的miRNA,随后通过生物信息学分析这些miRNA,找到与儿童哮喘发病有关的miRNA及靶基因;并通过RT-PCR技术验证芯片筛选出的miRNA及其相关靶基因,并发现与之相关的几个炎性因子信号通路,2)运用ELISA方法检测炎性因子水平,初步探索miRNA与哮喘表现型的相关性。[研究结果]:高通量芯片技术识别出尘螨所诱发的儿童哮喘中有表达差异的122个miRNAs(下调的10个miRNA,上调的112个miRNA)。在生物信息学分析的基础上,它们之中有10个miRNAs(下调的有151a-5p、625-5p、126-3p、513a-5p、27b-3p、22-3p;上调的有miRNA-550a-3p、let-7d-3p、501-5p、675-3p)及其靶基因被选择性的进行RT-PCR验证。发现下调的miRNA-27b-3p所调控的SYK,miRNA-513a-5p和-22-3p调控的PPARGC1B、CBL,miRNA-625-5p和miRNA-22-3p调控的ESR1,以及上调的miRNA-501-5p调控的MAP2K1,miRNA-675-3p调控的JAK2在尘螨组表达较正常组高,但miRNA-27b-3p与miRNA-513a-5p和miRNA-625-5p调控ONECUT2基因在尘螨组表达较正常组降低(p<0.05)。炎性因子及免疫球蛋白测定中IL-4、6和IgE上升、IL-12、α-TNF、γ-IFN分泌下降(p<0.05)。[结论]:我们发现和鉴定了一组与尘螨诱导的儿童哮喘相关的miRNA。我们的研究证实了,不同表达的miRNA可以引起其靶基因表达发生改变。这些改变有可能会影响炎性信号通路和炎性因子分泌改变,导致儿童哮喘发病。这些机理的具体变化,在今后的动物和或细胞模型研究中将进一步证实。