【摘 要】
：
中国淡水资源匮乏,干旱半干旱地区面积较大,且干旱是各种自然逆境中对植物影响较大的因素之一。蓖麻是一种经济价值比较高的油料作物,干旱是限制蓖麻生长的因素之一,探究其抗旱机制已成为当前关注的研究热点。本研究以蓖麻萌发期胚为实验材料,通过生理学测定、蛋白质组学及代谢组学联合分析,筛选与抗旱相关的基因;将蓖麻抗旱相关基因在蓖麻叶片中进行瞬时沉默表达分析验证其抗旱功能,在拟南芥中进行异源过表达和回补表达,分
论文部分内容阅读
中国淡水资源匮乏,干旱半干旱地区面积较大,且干旱是各种自然逆境中对植物影响较大的因素之一。蓖麻是一种经济价值比较高的油料作物,干旱是限制蓖麻生长的因素之一,探究其抗旱机制已成为当前关注的研究热点。本研究以蓖麻萌发期胚为实验材料,通过生理学测定、蛋白质组学及代谢组学联合分析,筛选与抗旱相关的基因;将蓖麻抗旱相关基因在蓖麻叶片中进行瞬时沉默表达分析验证其抗旱功能,在拟南芥中进行异源过表达和回补表达,分析基因对拟南芥参与抗旱的响应机制。实验结果如下:以水处理48 h（S48）,60 h（S60）,15%的PEG 6000处理48 h（P48）,60 h（P60）的蓖麻萌发期胚为实验材料,分别以S48、S60的胚为对照,对15%PEG 6000处理相同时间的胚样品P48、P60进行生理活性（CAT、SOD、POD、GST、T-AOC）、含量（MDA、H2O2、Pro）及羟自由基清除能力的测定,结果发现:与对照相比,随着处理时间的增加,蓖麻胚CAT活性、SOD活性、POD活性、H2O2含量、Pro含量、羟自由基清除能力均呈上升趋势,而GST活性、T-AOC活性、MDA含量呈下降趋势。对S48、S60、P48、P60四组处理样品进行蛋白质组学和代谢组学分析,共鉴定出401个差异表达蛋白质和408个差异表达代谢物。通过组学联合分析发现P48＿VS＿P60分组中,差异蛋白质和差异代谢物共同参与的代谢通路为抗坏血酸和醛酸代谢（Ascorbate and aldarate metabolism）、嘌呤代谢（Purine metabolism）;P48＿VS＿S48分组中差异蛋白质和差异代谢物共同参与13个代谢通路;P60＿VS＿S60分组中差异蛋白质和差异代谢物共同参与8个代谢通路;S48＿VS＿S60分组中没有共同参与的代谢通路,但水处理不同时间的差异蛋白质参与3个代谢通路,而差异代谢物被注释到20个不同的通路中。基于组学数据及RT-q PCR技术验证,最终选取显著上调的三个基因RcECP 63（LOC8274875）、RcDDX 31（LOC8282119）和RcA/HD1（LOC8277163）用于后续研究。通过对蓖麻叶片进行瞬时沉默表达分析发现,RcECP63、RcDDX31和RcA/HD13个基因被沉默后,与对照相比,在干旱胁迫条件下蓖麻叶片表面萎蔫更严重;沉默后3个基因的表达量显著下调;在生理指标的测定中发现MDA含量显著增加,而Pro、羟自由基清除能力及T-AOC的含量均呈现下降趋势,说明选取的3个基因在叶片参与干旱胁迫的响应中存在功能,推测这3个基因在蓖麻萌发期也参与干旱胁迫。通过比较胁迫条件下抗旱基因RcECP63、RcDDX 31和RcA/HD1在拟南芥突变体、回补表达、野生型和过表达四种类型的拟南芥生长状态、萌发情况、基因表达量情况和生理指标发现在不同浓度甘露醇培养基上的拟南芥随着胁迫浓度的升高,根长越来越短,侧根数越来越少,种子萌发率越来越低;与对照相比,经干旱胁迫后的过表达及回补表达转基因植株的基因表达量总体呈现上调的趋势;通过生理指标的测定进一步验证3个基因在干旱胁迫响应中的功能。本研究将为蓖麻抗旱机制的研究奠定基础。
其他文献
目的:通过琪顺古日古木-8和裸花紫珠片对良性前列腺增生术后恢复期内的影响用随机分组方法对照临床研究,系统评价琪顺古日古木-8对良性前列腺增生术后止血作用,明确琪顺古日古木-8的临床疗效和作用机理。方法:1.患者来源:选取2021年1月至2022年2月期间在内蒙古民族大学附属医院蒙西医结合泌尿外科住院,诊断为BPH及符合纳入标准,行HoLEP的60例患者,随机分为实验组（A组）和对照组（B组）。2.
目的 分析尿毒症患者行高通量血液透析（血透）治疗的临床效果。方法 70例尿毒症患者,以单双号方式分为对照组及观察组,每组35例。对照组采取低通量血透治疗,观察组采取高通量血透治疗。对比两组疗效、肾功能指标和并发症发生情况。结果 观察组治疗总有效率85.71%高于对照组的60.00%,差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组血肌酐（700.12±13.28）μmol/L、血尿素氮（16.42±2.1
目的:本研究通过分析455例急性脑梗死患者的基本信息、既往史、个人史、生化指标以及神经影像学检查结果,初步探索不同TOAST分型的进展性脑梗死相关危险因素,为改善患者的预后提供一定参考价值。方法:收集2019年12月至2020年12月间,齐齐哈尔医学院第一附属医院住院的急性脑梗死患者。对患者进行TOAST分型,根据标准分为进展性脑梗死组和非进展性脑梗死组。分析各组一般情况及空腹血糖、总胆固醇等生化
目的 探究补肾壮骨汤和连续性肾脏替代疗法（CRRT）联合使用对尿毒症患者钙磷代谢的影响。方法 186例患者采用随机数字表法分为2组，各93例。2组均行CRRT治疗，研究组加用补肾壮骨汤。结果 治疗后研究组血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、β2-微球蛋白（β2-MG）低于对照组，尿酸（UA）高于对照组（P＜0.05）;治疗后研究组血钙水平高于对照组，血磷及甲状旁腺激素（iPTH）水平低于对照组（P
目的 探究益气活血泻浊方加减对尿毒症患者血液透析（HD）治疗疗效及炎症反应的影响。方法 选取2020年1月—2021年6月浙江中医药大学附属湖州中医院收治的80例行HD治疗的尿毒症患者为研究对象，依据随机数字表法将患者分为对照组（40例）和观察组（40例）,对照组给予常规治疗，观察组在上述基础实施益气活血泻浊方加减治疗，连续治疗4周，比较两组患者临床疗效、中医证候积分、炎症因子水平、残余肾功能（R
目的 探讨尿毒症患者在血液透析治疗基础上加用左卡尼汀的临床效果。方法 60例尿毒症患者,随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组应用常规血液透析治疗,观察组在对照组治疗基础上加用左卡尼汀治疗。比较两组治疗效果及治疗前后炎性因子[白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）]、血液及营养指标（血清蛋白、血红蛋白、血清总蛋白、红细胞比容）、肾功能指标[尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）]
目的:观察黑苏嘎-25对嘎拉萨病患者的临床疗效及血清GDNF、IL-1β、TNF-α表达的影响方法:1.选取2020年12月-2022年1月期间内蒙古民族大学附属医院收治的70例嘎拉萨病患者,随机分成两组,分别为黑苏嘎-25治疗组和对照组,每组35例;2.观察两组患者治疗前、治疗后第7d以及随访第28d的嘎拉萨病蒙医症候评分、NIHSS评分、m RS评分、ADL评分的变化;3.采用酶联免疫分析法（
目的 观察尿毒症患者接受血液透析+血液灌注治疗后的实际效果与临床价值。方法 选择研究对象为56例尿毒症患者，就诊时间处于2021年8月-2022年8月期间，将所有资料均纳入计算机系统中分组，对照组（共纳入28例，采用血液透析治疗），观察组（共纳入28例，采用血液透析+血液灌流治疗），评定下列多项指标临床疗效、炎性因子水平、皮肤瘙痒程度、生化指标变化、大分子毒素水平。结果 观察组临床疗效为96.4%
目的:通过协日嘎-4味汤散预防妇科术后导尿管相关尿路感染的临床观察,为协日嘎-4味汤散临床研究及推广应用提供依据。方法:选取内蒙古民族大学附属医院2020年11月-2022年01月住院部妇科术后符合纳入标准的60例患者,随机分为观察组及对照组,观察组:30例患者（基础治疗+术后第一天开始午餐后沏服协日嘎-4味汤散3g,连用5天）。对照组:30例患者（基础治疗）。观察两组患者妇科术后拔出尿管48小时
土壤盐渍化是限制农业发展的重要因素之一。基因工程手段选育耐盐作物品种,是改良和利用盐碱地的有效手段之一。本研究基于“哲蓖3号”种子萌发期的转录组数据,筛选出上调表达的水通道蛋白家族的RcPIP2-4和RcPIP2-6基因,通过基因克隆、荧光定量分析、生物信息学分析、构建植物过表达和CRISPR/Cas9编辑载体、农杆菌介导法转化蓖麻并测定各类生理指标,分析该基因调控植株耐盐的生理生化和分子机理,对