论文部分内容阅读
氨基多糖作为一类重要的生物反应调节剂，在抗肿瘤、抗衰老和免疫调节等方面具有良好的应用前景。本论文以湛江产鲜短蛸为原料，对其做出营养评价，通过蛋白酶酶解提取得到肌肉、消化腺、生殖腺三组织的氨基粗多糖，初步探讨了三种粗多糖的免疫调节和抗氧化活性等。
本论文的试验内容与结果：
1.对肌肉、消化腺和生殖腺的主要营养成分、氨基酸及肌肉的脂肪酸组成进行分析及营养评价。结果表明，肌肉中粗蛋白质含量最高达80.8﹪，总糖含量在三组织中大小顺序为消化腺＞生殖腺＞肌肉，脂肪含量在5.03﹪～6.98﹪之间，灰分含量非常接近，在5.38﹪～6.01﹪之间；肌肉、消化腺和生殖腺蛋白质营养价分别为100、78和100；肌肉中共检测到20种脂肪酸，其中PUFA含量为40.89﹪。
2.用蛋白酶提取氨基多糖条件的确定：分别用3种蛋白酶酶解肌肉，确定所用酶量为木瓜蛋白酶1.2﹪、枯草杆菌中性蛋白酶1.4﹪、胰酶0.7﹪；试验6组双酶组合酶解肌肉，确定最佳酶组合条件为木瓜蛋白酶1.2﹪和枯草杆菌中性蛋白酶1.4﹪，50℃，pH7.0水解4小时。
3.采用提取肌肉氨基粗多糖(OOG1)的条件来提取消化腺(OOG2)和生殖腺多糖(OOG3)。三种多糖的提取率分别为0.5﹪、5﹪和5.5﹪，氨基多糖的含量分别为粗品的28.87﹪、23.41﹪和24.87﹪。
4.采用细胞计数法检测三种多糖对K562细胞的抑制作用。结果显示OOG1、OOG2和OOG3均对细胞具有一定的生长抑制作用。
5.采用MTT法检测三种粗多糖单独对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果显示，OOG1和OOG3在0.5mg/mL时对静止脾脏淋巴细胞有明显的促进作用。
6.采用MTT法检测三种粗多糖协同有丝分裂原ConA对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果显示，粗多糖协同ConA对小鼠脾脏淋巴细胞增殖不明显。
7.检测三种粗多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响，结果显示，各多糖均有一定吞噬作用，OOG1、OOG2、OOG3分别在浓度为0.5mg/mL、0.25mg/mL、0.5mg/mL达到最好效果。
8.采用免疫器官法检测三种粗多糖对正常和免疫抑制小鼠的免疫调节作用。腹腔注射CTX造成免疫抑制模型，灌胃OOG连续7天，测定胸腺和脾脏重量，计算脏体指数。OOG3能恢复免疫抑制组小鼠胸腺指数；OOG2和OOG3脾脏指数明显高于免疫抑制组。各多糖组跟正常组相比，均能使胸腺指数显著增加，对于脾脏指数影响效果不明显。
9.采用试剂盒进行羟自由基体系的清除试验。结果表明，一定浓度的OOG1和OOG2对羟自由基有一定的抑制效果，OOG1的最佳抑制效果为251.87U/mL。
10.采用试剂盒进行抗超氧阴离子自由基试验。结果表明，OOG2和OOG3最佳抑制超氧阴离子效果分别达到197.26U/L和106.85U/L，并且1.07mg/mLOOG2对超氧阴离子抑制率达到16.24﹪，比标准品高3.91﹪。
结论：
(1)短蛸是一种高蛋白低脂肪，蛋白质营养价值高，有益健康脂肪酸含量较高的海洋食品。
(2)从生物学活性试验可以得出，短蛸的三种粗多糖均具有一定的细胞毒作用和比较明显的免疫增强作用及一定的抗氧化作用。