乳酸菌体外筛选和高密度培养工艺研究是发酵剂及微生态制剂研制过程中的关键环节,对发酵乳制品的工业化生产和微生态制剂新产品的开发具有重要的理论意义和实际应用价值。本论文以人体来源的格氏乳杆菌为研究对象,通过体外耐酸、耐胆盐筛选试验获得优良菌株,进一步进行培养基优化、静态培养条件优化以及高密度培养工艺的研究,本研究获得主要结果如下:(1)格氏乳杆菌体外耐酸、耐胆盐试验结果表明:10株格氏乳杆菌对模拟人工胃液、肠液及胆盐的耐受性存在差异,其中格氏乳杆菌IMAU FB017对模拟人工胃液、肠液的耐受性最好,在胃液3 h、肠液4 h、肠液8 h的存活率分别为89.45%、61.19%和36.6%;胆盐延滞期为0.51 h。(2)格氏乳杆菌IMAU FB017增殖培养基配方优化,通过单因素试验、正交试验和响应面优化试验得到该菌的增殖培养基配方为:乳糖60.07 g/L,酵母浸粉56.62 g/L,酵母蛋白胨18.87 g/L,磷酸二氢钠19.46 g/L,磷酸氢二钠1.69 g/L,MgSO4.7H2O 1.0g/L,MnSO4·5H2O 0.08 g/L,L-半胱氨酸盐酸盐 0.2 g/L。(3)格氏乳杆菌IMAU FB017静态培养条件优化结果为:初始pH 6.0、温度37℃、接种量1%。采用优化培养基配方及最佳静态培养条件对该菌株进行培养,发酵液活菌数可达(3.15±0.16)×109CFU/mL,较优化前在MRS培养基中培养的活菌数(8.15±0.42)×108CFU/mL 提高了 2.86 倍。(4)格氏乳杆菌IMAU FB017高密度培养工艺优化结果为:恒pH 5.5、中和剂为质量分数25%的氨水、气体成分为氮气保压。在5L全自动机械搅拌发酵罐中培养,菌体生长速度快、对数生长期延长、菌体密度显著提高,活菌数可达(4.98±0.28)×109CFU/mL,较优化前(8.15±0.42)×108 CFU/mL提高了 5.11 倍。从10株格氏乳杆菌中优选出耐酸、耐胆盐性能良好的格氏乳杆菌IMAU FB017,对其培养基配方及静态培养条件进行优化,确定高密度培养工艺,为格氏乳杆菌IMAU FB017后续工业化生产奠定理论基础。