氯氟氰菊酯降解菌的筛选及降解特性研究

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氯氟氰菊酯是拟除虫菊酯类杀虫剂的一种,虽然氯氟氰菊酯被认为是高效低毒的农药,但是,由于具有对光、热稳定的特点,造成了作物和土壤中此类农药的大量残留,尤其是在温室大棚等人为控制的环境下降解更趋困难,给人们的健康带来了巨大的威胁。微生物修复技术是一项综合性的技术,该技术利用微生物的新陈代谢能力及微生物所产生酶的多样性,把大分子有机污染物转化为小分子无机污染物,重新进入地球化学循环中。因而,农药残留的微生物降解技术具有高效、无毒、无二次污染的特点,而且经济实用,操作简便,目前已成为去除农药残留污染的一种重要方法。本研究从杨凌大地农药厂采集污染土样,以氯氟氰菊酯为唯一碳源,对其中的氯氟氰菊酯降解菌进行逐级驯化筛选,得到高降解能力的氯氟氰菊酯降解菌。对所得菌株进行了生化分子生物学、降解条件、田间试验等方面的研究,主要内容和所得结论如下:1.以相对贫乏的无机盐培养基作为限制性条件构建菌株筛选模式。选用摇瓶液体培养加平板筛选的方法分离得到8株有明显降解活性的菌株,其中标记为XJ-2的细菌菌株降解率最高,达到77.2%。2.菌株的生理生化特性。通过细菌革兰氏染色实验,表明XJ-2菌株为革兰氏阴性菌。16s rDNA序列测定,初步鉴定XJ-2菌株为鞘氨醇杆菌(Sphingoba-cterium sp)。该菌能以氯氟氰菊酯为唯一碳源,也能利用其他多种碳、氮源。3.菌株降解条件研究。XJ-2菌株适宜生长的温度、pH范围较广,最适生长温度和pH值分别为30℃和7.0;对氯氟氰菊酯农药耐受性强,在浓度达500 mg/L的条件下仍有39.7%的降解效果;在温度为30℃、pH 7.0、160 rpm条件下培养7d,XJ-2菌株对浓度为200 mg/L氯氟氰菊酯降解率为77.2%。从XJ-2菌株生长曲线可知,菌株XJ-2生长的对数期和稳定期在48~144h。4.菌株降解条件响应面优化。运用Design-Expert和SAS软件建立了响应面分析的三维模型,确定了XJ-2菌株对氯氟氰菊酯的最佳降解条件为:pH 7.67、温度29.98℃、葡萄糖添加浓度为1.23g/L,理论降解率可达:80.15%。5.田间实验结果表明:XJ-2菌株在未添加葡萄糖和添加1.2g/L葡萄糖的条件下,6d内的降解率分别为41.2%和49.8%。
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