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背景缺血性中风和在溶栓治疗后的缺血再灌注损伤导致的血脑屏障的破坏,引起脑水肿的发展和出血倾向。尽管急性脑卒中的整体治疗的进步,然而脑组织缺血导致的水肿或严重脑疝仍然是中风患者最初几天内主要的死亡原因。因此,保护血脑屏障的药物用于治疗缺血性中风可能是一个很有前途的治疗措施。内皮细胞的血脑屏障是血液和脑之间的第一条防线,内皮屏障的渗透性受两种不同的路线调控,一个是旁细胞途径,这是通过内皮连接;另一个是跨细胞途径,是通过Caveolae介导的囊泡运输。相邻的内皮细胞之间的紧密连接(TJs)在缺血性中风过程的血脑屏障破坏中起着至关重要的作用,TJ由三种类型组成的跨膜蛋白:claudins,occludin,JAMs,和一些细胞质的辅助蛋白,包括ZOs,其中claudin-5,occludin,JAM-1和ZO-1在缺血的血脑屏障损害中发挥了举足轻重的作用。Caveolae是一个在细胞质中的50-100nm质膜囊泡,具有重要的调节内皮细胞功能,包括白蛋白的跨膜转运。Caveolin蛋白是Caveolae主要结构蛋白,caveolin-1作为Caveolae的主要标志物,在Caveolae介导的白蛋白胞吞转运必不可少。在病理条件下的血脑屏障的破坏会导致白蛋白通过旁细胞胞途径和跨细胞途径的漏出增加。苦碟子注射液在中国广泛使用于治疗脑血管疾病的药物,苦碟子注射液已被证明可以减轻脑微循环障碍和脑神经元损伤。然而,苦碟子注射液在脑缺血后血脑屏障破坏的影响方面没有研究。目的苦碟子注射液对MCAO模型大鼠血脑屏障的保护作用及对紧密连接和caveolin-1的影响。方法1.建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型和干预措施:雄性SD大鼠,280g,进行1小时的大脑中动脉闭塞后给予苦碟子注射液4ml/Kg,微量注射泵静脉给药。24小时再灌注后,观测各指标。2.五级评分法对大鼠进行神经功能损伤评分。3.TTC染色法观察大鼠脑梗死面积的变化。4.激光多普勒血流成像系统观察大鼠脑血流量的变化。5.计算大鼠脑组织干湿比,检测脑水肿程度。6.正置荧光显微镜观察白蛋白漏出。7.伊文思蓝染色法观察伊文思蓝漏出率。8.固定化蛋白印迹法(Western-Blot)检测紧密连接相关蛋白和cavelin-1及其磷酸化的表达。结果1MCAO模型大鼠均发生程度不等的神经功能损伤症状,应用苦碟子注射液进行干预后,其神经功能损伤评分显著下降(P<0.01)。2 MCAO模型大鼠出现脑梗死,苦碟子注射液进行干预后,减少其梗死面积(P<0.01)。3 MCAO模型大鼠脑组织血流量降低,应用苦碟子注射液进行干预后,明显增加大鼠表面脑血量(P<0.01)。4 MCAO模型大鼠脑水肿加重,应用苦碟子注射液进行干预后,大鼠脑水肿减轻(P<0.01)。5 MCAO模型大鼠伊文思蓝外渗,在苦碟子注射液干预后大幅减少(P<0.01)。6 MCAO模型大鼠白蛋白渗漏增加,苦碟子注射液干预后减少白蛋白的渗漏(P<0.01)。7 Western-blot分析显示,缺血后内皮细胞之间的紧密连接蛋白claudin-5,JAM-1,occludin和ZO-1明显降解,caveolin-1及其磷酸化的水平增加,苦碟子注射液治疗后缓解(P<0.01)。结论苦碟子注射液后处理显著降低MCAO模型大鼠血脑屏障的通透性和脑水肿,这与防止紧密连接蛋白claudin-5,JAM-1,occludin和ZO-1的降解和caveolin-1及其磷酸化的表达增加有关,这些发现提供了一种新的治疗缺血性中风的方法。